24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3039  |  回复: 9

鲲鹏展翅

新虫 (初入文坛)

[求助] 昆虫RNA 提取!电泳图,看不懂!请高手指点!

用trizol法 提取小菜蛾体内RNA ,marker是2000bp的!跑出来的电泳,不知道什么东西? 除了什么原因?
(本实验室无分子实验经验,本人从0开始!悲催的!啥也不懂啊!)



请各位高手指点!



回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jukongka

铁杆木虫 (著名写手)

年度最忠心木虫

【答案】应助回帖

鲲鹏展翅(金币+1): 非常感谢您帮助 2011-10-31 12:20:48
RNA降解了,提取的器皿要用DEPC水浸泡,玻璃和金属器皿200度高温2小时处理。耗材买RNase free的
2楼2011-10-31 08:29:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jukongka

铁杆木虫 (著名写手)

年度最忠心木虫


silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-11-17 12:17:03
论坛里关于RNA提取的帖子:
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3212737&fpage=1
3楼2011-10-31 08:34:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

独自干杯

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare(金币+3): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:17:17
降解了,提取温度也应该低一些,提取用具要用DEPC水泡,提取速度要快。
4楼2011-10-31 10:03:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鲲鹏展翅

新虫 (初入文坛)

谢谢各位帮助!
5楼2011-10-31 12:22:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

447585565

木虫 (正式写手)

降解的很厉害~~!
6楼2011-10-31 16:27:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

脱水拂空

铜虫 (正式写手)

都已经降解啦 所有东西都要在无RANase条件下进行
7楼2011-11-05 14:34:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
silicare(金币+4): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:17:53
是否为普通琼脂糖电泳?
如为普通的琼脂糖凝胶电泳(检测RNA)可以不用跑那么久。以下为我的电泳条件:(最好用RNA专用的电泳槽,新配电泳液。)
上样量:小孔约200ng(中孔可上500-1000ng)1.5% gel, 约7-8V/cm,电泳15-20min(溴芬兰跑离孔约2cm)
EB染色5min。

提取过程严格按RNA操作要求操作。东西肯定要干净这个不用说的了,另外注意一要快,二要低温! 可取些动物肝脏多操作几次练练手。
伟大航线....
8楼2011-11-10 20:29:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cyz20050505

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
silicare(金币+3): 谢谢参与 2011-11-17 12:18:15
先用液氮研磨组织,组织别太多,研磨充分后(期间要一直有液氮保持低温)将组织粉末连同未挥发完的液氮一并倒入玻璃匀浆器(预习加入troznl试剂,并置于冰上),然后直接磨其他组织,待化开后,开始匀浆,匀浆充分后就可以开始提取了。玻璃和铁制器皿200度干烤3个小时,有机试剂不用处理,水必须是DEPC处理的水,EP管和枪头最后买公司生产的RNase-free的管,没有的话,也用DEPC处理。电泳变性不变性没有影响,我甚至用普通的EP管装RNA,也没见它降解。根据我个人经验,前期研磨和匀浆是至关重要的一步。操作带手套,口罩,穿大褂。
9楼2011-11-17 10:48:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wansanlian

金虫 (小有名气)

我们也是从0过来的,没事,你慢慢做的话应该会好了,我之前做的时候跑的也跟你的第一个图一样的,但是第二个图的时候你再少加点量看下会不会看的清,如果条带很靠后,基本上都是己经降解了的呢~一般28S会在1.5K左右的位置
乱花渐欲迷人眼
10楼2012-05-09 13:15:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 鲲鹏展翅 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿211,0703化学305分求调剂 +8 严西西戏 2026-04-06 9/450 2026-04-06 22:24 by chenzhimin
[考研] 285求调剂 +14 哦呦呼o 2026-04-04 16/800 2026-04-06 21:23 by 蓝云思雨
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +9 哇呼哼呼哼 2026-04-02 10/500 2026-04-06 19:47 by jean5056
[考研] 生物与医药求调剂 +7 heguanhua 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:41 by macy2011
[考研] 0817化学工程与技术求调剂,一志愿中海洋319 +14 lv945 2026-04-04 14/700 2026-04-06 10:20 by 蓝云思雨
[考研] 生物与医药086000调剂一志愿西北农林320分 +3 美美女士 2026-04-03 3/150 2026-04-05 21:55 by 学员8dgXkO
[考研] 329求调剂 +17 miaodesi 2026-04-02 20/1000 2026-04-05 18:33 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +6 cs0106 2026-04-05 6/300 2026-04-05 16:34 by imissbao
[考研] +5 化工专硕323分 2026-04-04 5/250 2026-04-05 08:02 by 544594351
[考研] 材料调剂 +15 一样YWY 2026-04-01 15/750 2026-04-04 22:23 by hemengdong
[考研] 材料调剂 +10 懒羊羊轻置玉臀 2026-04-02 11/550 2026-04-04 21:56 by laoshidan
[考研] 298求调剂 +5 zzz,,r 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:55 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿华南师范361分,化学求调剂 +7 Nicole88888 2026-04-01 7/350 2026-04-04 18:28 by macy2011
[考研] 325求调剂 +4 春风不借意 2026-04-04 4/200 2026-04-04 14:46 by 湘农储能材料
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突, 2026-03-31 4/200 2026-04-04 13:34 by 1753564080
[考研] 一志愿重庆大学085404,总分314分,求调剂 +4 zf83hn 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:25 by 啵啵啵0119
[考研] 315求调剂 +6 顺理成张 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:04 by 百灵童888
[考研] 285求调剂 +8 AZMK 2026-04-02 11/550 2026-04-02 20:16 by yulian1987
[考研] 生物学327,求调剂 +5 书上的梅子 2026-04-01 6/300 2026-04-02 06:47 by ilovexiaobin
[考研] 求调剂 生物学 377分 +6 zzll03 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:33 by 唐沐儿
信息提示
请填处理意见