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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 昆虫RNA 提取！电泳图，看不懂！请高手指点！
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鲲鹏展翅

新虫 (初入文坛)

[求助] 昆虫RNA 提取！电泳图，看不懂！请高手指点！

用trizol法 提取小菜蛾体内RNA ，marker是2000bp的！跑出来的电泳，不知道什么东西？ 除了什么原因？
（本实验室无分子实验经验，本人从0开始！悲催的！啥也不懂啊！）



请各位高手指点！
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1楼 2011-10-31 07:44:52
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longrna

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
silicare(金币+4): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:17:53
是否为普通琼脂糖电泳？
如为普通的琼脂糖凝胶电泳（检测RNA）可以不用跑那么久。以下为我的电泳条件：（最好用RNA专用的电泳槽，新配电泳液。）
上样量：小孔约200ng（中孔可上500-1000ng）1.5% gel， 约7-8V/cm，电泳15-20min(溴芬兰跑离孔约2cm)
EB染色5min。

提取过程严格按RNA操作要求操作。东西肯定要干净这个不用说的了，另外注意一要快，二要低温！ 可取些动物肝脏多操作几次练练手。
赞一下(1人) 回复此楼
伟大航线....
8楼2011-11-10 20:29:26
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jukongka

铁杆木虫 (著名写手)

年度最忠心木虫

【答案】应助回帖

鲲鹏展翅(金币+1): 非常感谢您帮助 2011-10-31 12:20:48
RNA降解了，提取的器皿要用DEPC水浸泡，玻璃和金属器皿200度高温2小时处理。耗材买RNase free的
赞一下 回复此楼
2楼2011-10-31 08:29:54
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jukongka

铁杆木虫 (著名写手)

年度最忠心木虫
★
silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-11-17 12:17:03
论坛里关于RNA提取的帖子：
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3212737&fpage=1
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-10-31 08:34:37
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独自干杯

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare(金币+3): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:17:17
降解了，提取温度也应该低一些，提取用具要用DEPC水泡，提取速度要快。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-10-31 10:03:30
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