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鲲鹏展翅

新虫 (初入文坛)

[求助] 昆虫RNA 提取!电泳图,看不懂!请高手指点!

用trizol法 提取小菜蛾体内RNA ,marker是2000bp的!跑出来的电泳,不知道什么东西? 除了什么原因?
(本实验室无分子实验经验,本人从0开始!悲催的!啥也不懂啊!)



请各位高手指点!



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longrna

新虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
silicare(金币+4): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:17:53
是否为普通琼脂糖电泳?
如为普通的琼脂糖凝胶电泳(检测RNA)可以不用跑那么久。以下为我的电泳条件:(最好用RNA专用的电泳槽,新配电泳液。)
上样量:小孔约200ng(中孔可上500-1000ng)1.5% gel, 约7-8V/cm,电泳15-20min(溴芬兰跑离孔约2cm)
EB染色5min。

提取过程严格按RNA操作要求操作。东西肯定要干净这个不用说的了,另外注意一要快,二要低温! 可取些动物肝脏多操作几次练练手。
伟大航线....
8楼2011-11-10 20:29:26
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jukongka

铁杆木虫 (著名写手)

年度最忠心木虫

【答案】应助回帖

鲲鹏展翅(金币+1): 非常感谢您帮助 2011-10-31 12:20:48
RNA降解了,提取的器皿要用DEPC水浸泡,玻璃和金属器皿200度高温2小时处理。耗材买RNase free的
2楼2011-10-31 08:29:54
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jukongka

铁杆木虫 (著名写手)

年度最忠心木虫


silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-11-17 12:17:03
论坛里关于RNA提取的帖子:
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3212737&fpage=1
3楼2011-10-31 08:34:37
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独自干杯

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare(金币+3): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:17:17
降解了,提取温度也应该低一些,提取用具要用DEPC水泡,提取速度要快。
4楼2011-10-31 10:03:30
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