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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA电泳条带问题？
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无花草

新虫 (初入文坛)

[求助] RNA电泳条带问题？

各位虫友大家好，小弟对RNA的电泳条带不怎么了解，请大家帮忙分析分析一下我的RNA电泳条带，图件附件，途中标的的A,B,C,D哪三个是28S,18S,5S。（苹果叶片总RNA，用试剂盒提取的）。还有从电泳图可知RNA降解情况怎么样？帮忙总结一下，对于RNA电泳条带，怎么分析？
RNA电泳条带问题？
2013-7-2.jpg 拷贝.jpg
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好好做实验，毕业找份好工作！
1楼 2013-07-15 11:05:21
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
无花草: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-07-15 15:08:21
gyesang: 金币+2, 鼓励应助交流！ 2013-07-17 00:54:06
A: 28S B:18S  D:5S  （C为一些其他的RNA）
主要是因为上样量过多导致现在分开不明显的现象，建议减少上样量（可减少至1/3），即可跑出明显三条主带的RNA电泳图。
电泳条件：7-8V/cm，电泳20-30min，1.2-1.5%胶，新鲜配制电泳缓冲液。
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伟大航线....
3楼2013-07-15 11:54:17
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longrna

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hyphen007 at 2013-07-15 12:00:00
如果A28 B18的话，咋看着不像2：1啊，？

点样量太多影响亮度比。
平时没事拿些无用的RNA点个梯度一跑即可发现上样量多的时候跑出来就长这个样子。A就是28S
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伟大航线....
6楼2013-07-15 16:28:51
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
无花草: 金币+3, ★有帮助 2013-07-15 15:08:38
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-17 00:53:52
从植物叶片里提RNA会有更多的带，因为叶片里含有大量叶绿体，所以不仅有真核生物的28S,18S, 5S，还有原核属性的23S, 16S, 5S。在没有marker的情况下，具体你的条带对应什么不是很好说。看rRNA完整情况主要是看28S/18S，如果果亮度大致为2:1，说明RNA的完整性好.
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2楼2013-07-15 11:42:20
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hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
无花草: 金币+1 2013-07-15 15:08:56
如果A28 B18的话，咋看着不像2：1啊，？
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4楼2013-07-15 12:00:00
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hyphen007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
无花草: 金币+1 2013-07-15 15:09:01
marker呢？没有marker不好说，也许B28，C18？不懂，瞎说的，见谅啊
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5楼2013-07-15 12:01:16
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grape_vine

金虫 (小有名气)
没有marker还是不行,用dl2000,结果可能就清晰很多,这个图,大家还不好下结论说谁是谁.
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7楼2013-07-15 22:10:37
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hardytam

铁虫 (初入文坛)
减少上样量，再试下，28s比18s亮1.5倍以上，证明RNA 比较好。
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8楼2013-07-16 11:53:18
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无花草

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by longrna at 2013-07-15 16:28:51
点样量太多影响亮度比。
平时没事拿些无用的RNA点个梯度一跑即可发现上样量多的时候跑出来就长这个样子。A就是28S...

嗯，什么时候试试！谢谢！
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好好做实验，毕业找份好工作！
9楼2013-07-16 18:02:08
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shucanwei

木虫 (正式写手)
按我的经验，估计不行！
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唯以一人治天下，不以天下奉一人。
10楼2013-07-17 00:19:44
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