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ya5ya

新虫 (初入文坛)

[求助] CTAB法提取RNA,电泳后完全无条带

我采用的是CTAB法提取RNA,分三次从左至右共提取14个样。第一次提两个,后面两次分别提取6个,跑胶图片如下。样1清楚,样三模糊,其余完全无条带。请高手指点,有可能是什么原因?(1.应该不是试剂的问题,如果是,样3不会有条带。2.也不是降解吧,总会有点痕迹)新手上路,谢谢指教!

20120927 14个样.jpg
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tulip1213

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
重新跑电泳确定一下;或者重新提,一次提样太多了。买TAKARA的Trizol试剂提取,效果很好
2楼2012-10-16 18:36:11
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zhangby2002

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-10-17 14:44:52
RNA提取比较简单呀,RNA提取你最好用新鲜组织,Trizol法和试剂盒都行,整个过程中严格操作,防止外源的和内源的污染,整个过程在冰上操作,有专一提取RNA的房间最好,刚开始学习,熟练就好。相信你会成功的。
业精于勤,荒于嬉;行成于思,毁于随。
3楼2012-10-16 18:54:50
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ya5ya

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tulip1213 at 2012-10-16 18:36:11
重新跑电泳确定一下;或者重新提,一次提样太多了。买TAKARA的Trizol试剂提取,效果很好

我是提前一天磨好的样,所以一次提取了六个。请问,你们一般一次提取几个呢?CTAB是之前师姐验证过的,相比较其他方法,更适合我的材料,所以就用这个了。
4楼2012-10-17 09:09:35
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tulip1213

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-10-17 14:45:08
引用回帖:
4楼: Originally posted by ya5ya at 2012-10-17 09:09:35
我是提前一天磨好的样,所以一次提取了六个。请问,你们一般一次提取几个呢?CTAB是之前师姐验证过的,相比较其他方法,更适合我的材料,所以就用这个了。...

接触RNA的所有东西不要被酶污染。Trizol试剂是目前最好的RNA提取试剂。当时磨当时提,RNA在液氮环境下,trizol环境下,酚氯仿环境下不会降解。CTAB法,应该也不错,那配制的溶液杜绝酶污染,一定是DEPC处理过的水配。
5楼2012-10-17 11:07:07
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杨树林117

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

提取RNA时最好现磨现提,很容易降解,我最近也在用CTAB提RNA,效果还可以,就是很慢,每次最多提四个样
6楼2012-10-22 22:07:58
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