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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 植物RNA提取后电泳检测
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crazymouse66

金虫 (正式写手)

[求助] 植物RNA提取后电泳检测

请问大家，我们在提取植物的总RNA后悔做一次电泳检测，一办都会看到三条条带，如果提的好的话会看到四条条带，请问这几条条带相应的位置都是什么RNA？我们凭什么可以这样检测提取RNA成功与否？
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1楼 2012-04-30 19:51:23
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回帖置顶 ( 共有2个 )

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
crazymouse66: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 回答的很认真，谢谢，学到了 2012-05-01 16:15:18
amisking: APEPI+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-05-01 20:14:24
植物总RNA电泳一般是三条带，从上到下依次是28S，18S，5S。28s和18s条带主要是核糖体RNA，信使RNA和其他小RNA一般都会跑出胶外或浓度过低不足以形成可观察条带。5s主要是5s rRNA和tRNA以及其他一些低分子量RNA。一般只要电泳结果条带没有弥散，且28S条带亮度是18S的二分之一，就可以认为总RNA提取质量可以满足进一步实验要求。
有些植物RNA跑电泳会跑出三条以上条带，额外出现的条带主要是植物线粒体及叶绿体RNA。
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crazymouse66
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2012-05-01 02:20:01
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
jhu132llh: 金币+3, APEPI+1, 鼓励积极交流 2012-05-01 21:28:59
引用回帖:
5楼: Originally posted by 欢仔 at 2012-05-01 18:51:34:
想问下电泳结果有弥散 说明什么

发生弥散，主要说明RNA已经降解，如果弥散向点样孔方向，也可能是电泳条件不合适及盐残留导致。如果整个电泳结果显示为一大团光带，则可能是上样过量。另外，如果28S以上至点样孔有弥散条带，则还有可能是DNA干扰。总之还是需要多做一些实验自己积累经验。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
6楼2012-05-01 19:31:27
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xq_delia

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-01 02:20:01:
植物总RNA电泳一般是三条带，从上到下依次是28S，18S，5S。28s和18s条带主要是核糖体RNA，信使RNA和其他小RNA一般都会跑出胶外或浓度过低不足以形成可观察条带。5s主要是5s rRNA和tRNA以及其他一些低分子量RNA。一 ...

貌似28S条带亮度是18S的两倍吧，一样亮应该也是可以用的
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9楼2012-05-15 15:17:14
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欢仔

银虫 (正式写手)
★
jhu132llh: 金币+1, 鼓励积极交流 2012-05-01 21:28:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-01 02:20:01:
植物总RNA电泳一般是三条带，从上到下依次是28S，18S，5S。28s和18s条带主要是核糖体RNA，信使RNA和其他小RNA一般都会跑出胶外或浓度过低不足以形成可观察条带。5s主要是5s rRNA和tRNA以及其他一些低分子量RNA。一 ...

想问下电泳结果有弥散 说明什么
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勇于尝试新鲜事物
5楼2012-05-01 18:51:34
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sibird

银虫 (初入文坛)
28S rRNA 是18S rRNA亮度 的两倍。
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goon
13楼2013-06-25 10:22:03
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普通回帖

crazymouse66

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-01 02:20:01:
植物总RNA电泳一般是三条带，从上到下依次是28S，18S，5S。28s和18s条带主要是核糖体RNA，信使RNA和其他小RNA一般都会跑出胶外或浓度过低不足以形成可观察条带。5s主要是5s rRNA和tRNA以及其他一些低分子量RNA。一 ...

真的十分感谢，现在终于明白了，谢谢啊！
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3楼2012-05-01 08:39:41
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wuweibewin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
jhu132llh: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励积极交流 2012-05-15 20:42:10
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-01 02:20:01:
植物总RNA电泳一般是三条带，从上到下依次是28S，18S，5S。28s和18s条带主要是核糖体RNA，信使RNA和其他小RNA一般都会跑出胶外或浓度过低不足以形成可观察条带。5s主要是5s rRNA和tRNA以及其他一些低分子量RNA。一 ...

貌似28S，18S，5S，是动物中的说法！植物中的大亚基组成的rRNA似乎不是28S，我记得是25-27S，18SrRNA也不对！望注意纠正！
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wuwei_hello@163.com
4楼2012-05-01 17:51:04
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★
jhu132llh: 金币+2, 鼓励积极交流 2012-05-15 20:42:00
引用回帖:
4楼: Originally posted by wuweibewin at 2012-05-01 17:51:04:
貌似28S，18S，5S，是动物中的说法！植物中的大亚基组成的rRNA似乎不是28S，我记得是25-27S，18SrRNA也不对！望注意纠正！

真细心。
植物细胞，真菌和一些原生动物细胞内核糖体大亚基rRNA沉降系数是25-26。但我认为，在讨论RNA电泳时，笼统地说所有真核细胞都可以跑出28和18S条带也没什么问题。毕竟事实上那些条带都是很多RNA的集合体。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
7楼2012-05-01 21:42:25
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wansanlian

金虫 (小有名气)
一般情况下都是28S和18S还有5S三条带之说,不过有的时候会根据你的材料,如是酵母的时候就说的是26S和16S,还有5S吧
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乱花渐欲迷人眼
8楼2012-05-09 13:13:44
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yqin1986

铁虫 (初入文坛)
28S是18S的两倍！！！！
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10楼2012-08-06 09:28:35
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