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crazymouse66

金虫 (正式写手)

[求助] 植物RNA提取后电泳检测

请问大家,我们在提取植物的总RNA后悔做一次电泳检测,一办都会看到三条条带,如果提的好的话会看到四条条带,请问这几条条带相应的位置都是什么RNA?我们凭什么可以这样检测提取RNA成功与否?
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
jhu132llh: 金币+3, APEPI+1, 鼓励积极交流 2012-05-01 21:28:59
引用回帖:
5楼: Originally posted by 欢仔 at 2012-05-01 18:51:34:
想问下电泳结果有弥散 说明什么

发生弥散,主要说明RNA已经降解,如果弥散向点样孔方向,也可能是电泳条件不合适及盐残留导致。如果整个电泳结果显示为一大团光带,则可能是上样过量。另外,如果28S以上至点样孔有弥散条带,则还有可能是DNA干扰。总之还是需要多做一些实验自己积累经验。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
6楼2012-05-01 19:31:27
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
crazymouse66: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 回答的很认真,谢谢,学到了 2012-05-01 16:15:18
amisking: APEPI+1, 鼓励发帖帮助解答问题。 2012-05-01 20:14:24
植物总RNA电泳一般是三条带,从上到下依次是28S,18S,5S。28s和18s条带主要是核糖体RNA,信使RNA和其他小RNA一般都会跑出胶外或浓度过低不足以形成可观察条带。5s主要是5s rRNA和tRNA以及其他一些低分子量RNA。一般只要电泳结果条带没有弥散,且28S条带亮度是18S的二分之一,就可以认为总RNA提取质量可以满足进一步实验要求。
有些植物RNA跑电泳会跑出三条以上条带,额外出现的条带主要是植物线粒体及叶绿体RNA。

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植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-05-01 02:20:01
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crazymouse66

金虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-01 02:20:01:
植物总RNA电泳一般是三条带,从上到下依次是28S,18S,5S。28s和18s条带主要是核糖体RNA,信使RNA和其他小RNA一般都会跑出胶外或浓度过低不足以形成可观察条带。5s主要是5s rRNA和tRNA以及其他一些低分子量RNA。一 ...

真的十分感谢,现在终于明白了,谢谢啊!
3楼2012-05-01 08:39:41
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wuweibewin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
jhu132llh: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励积极交流 2012-05-15 20:42:10
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-05-01 02:20:01:
植物总RNA电泳一般是三条带,从上到下依次是28S,18S,5S。28s和18s条带主要是核糖体RNA,信使RNA和其他小RNA一般都会跑出胶外或浓度过低不足以形成可观察条带。5s主要是5s rRNA和tRNA以及其他一些低分子量RNA。一 ...

貌似28S,18S,5S,是动物中的说法!植物中的大亚基组成的rRNA似乎不是28S,我记得是25-27S,18SrRNA也不对!望注意纠正!
wuwei_hello@163.com
4楼2012-05-01 17:51:04
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