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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » CTAB法提取RNA,电泳后完全无条带
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ya5ya

新虫 (初入文坛)

[求助] CTAB法提取RNA,电泳后完全无条带

我采用的是CTAB法提取RNA,分三次从左至右共提取14个样。第一次提两个，后面两次分别提取6个，跑胶图片如下。样1清楚，样三模糊，其余完全无条带。请高手指点，有可能是什么原因？（1.应该不是试剂的问题，如果是，样3不会有条带。2.也不是降解吧，总会有点痕迹）新手上路，谢谢指教！

２０１２０９２７　１４个样.jpg
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1楼 2012-10-15 21:36:29
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zhangby2002

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-10-17 14:44:52
RNA提取比较简单呀，RNA提取你最好用新鲜组织，Trizol法和试剂盒都行，整个过程中严格操作，防止外源的和内源的污染，整个过程在冰上操作，有专一提取RNA的房间最好，刚开始学习，熟练就好。相信你会成功的。
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业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。
3楼2012-10-16 18:54:50
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tulip1213

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
重新跑电泳确定一下；或者重新提，一次提样太多了。买TAKARA的Trizol试剂提取，效果很好
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2楼2012-10-16 18:36:11
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ya5ya

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tulip1213 at 2012-10-16 18:36:11
重新跑电泳确定一下；或者重新提，一次提样太多了。买TAKARA的Trizol试剂提取，效果很好

我是提前一天磨好的样，所以一次提取了六个。请问，你们一般一次提取几个呢？CTAB是之前师姐验证过的，相比较其他方法，更适合我的材料，所以就用这个了。
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4楼2012-10-17 09:09:35
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tulip1213

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-10-17 14:45:08
引用回帖:
4楼: Originally posted by ya5ya at 2012-10-17 09:09:35
我是提前一天磨好的样，所以一次提取了六个。请问，你们一般一次提取几个呢？CTAB是之前师姐验证过的，相比较其他方法，更适合我的材料，所以就用这个了。...

接触RNA的所有东西不要被酶污染。Trizol试剂是目前最好的RNA提取试剂。当时磨当时提，RNA在液氮环境下，trizol环境下，酚氯仿环境下不会降解。CTAB法，应该也不错，那配制的溶液杜绝酶污染，一定是DEPC处理过的水配。
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5楼2012-10-17 11:07:07
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