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lvye3707

金虫 (正式写手)

[求助] CTAB法提取RNA

用ctab法提取RNA在加入licl —20°c放置20min 12000rpm 4度离心15min  这时候溶液底部什么也没看到  可能是什么原因引起的

[ Last edited by lvye3707 on 2011-11-12 at 15:50 ]
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1楼 2011-11-12 13:24:31
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纳兰欣光

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

lvye3707(金币+2): 谢谢了，昨天硬着头皮做下了，没想到结果还挺好 ，嘿嘿~ 不过记得上次做的时候这时能看到点东西的~ 2011-11-13 09:43:57
引用回帖:
1楼: Originally posted by lvye3707 at 2011-11-12 13:24:31:
用ctab法提取RNA在加入licl —20°c放置20min 12000rpm 4度离心15min  这时候溶液底部什么也没看到  可能是什么原因引起的
[ Last edited by lvye3707 on 2011-11-12 at 15:50 ]

我都是4度过夜沉淀，如果看不到东西也不要紧，可以继续往下做，到最后跑胶检测到底有没有。。。
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2楼2011-11-12 21:35:05
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longrna

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): good！对楼主有帮助！ 2011-11-14 16:42:37
产量低或都没有产量就看不到呗.....

可能的原因多了
物种、所用实验材料的量、提取方法、实验操作

不过如果是看不到沉淀这种情况往下的操作得非常小心小心翼翼，不然一不小心就把RNA弄丢了...
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lvye3707
伟大航线....
3楼2011-11-13 14:18:37
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youngker918

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

lvye3707(金币+3): o ...谢谢了 2011-11-13 20:52:13
你放置的时间太短了，我们一般放8-12个小时，也不能放时间太长，放太长了DNA也要沉淀出来了
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天才就怕不够天才，坏又不够坏，天天都想离开，却不知何处才能换骨脱胎
4楼2011-11-13 16:53:39
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dreamshaker

铜虫 (正式写手)
LiCl沉淀RNA，DNA却留在溶液中，至于为什么没有看到沉淀RNA，可能是你小提吧，取材比较少，RNA通常是白色的透明，离过心之后会在管底，量当然是很少了，没有仔细看，你很可能疏忽了没有看到。否则的话你就检查你前面的步骤吧，操作，试剂等是否有问题。
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lvye3707
踏踏实实，体会科研的乐趣
5楼2011-11-14 00:17:06
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lvye3707

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by dreamshaker at 2011-11-14 00:17:06:
LiCl沉淀RNA，DNA却留在溶液中，至于为什么没有看到沉淀RNA，可能是你小提吧，取材比较少，RNA通常是白色的透明，离过心之后会在管底，量当然是很少了，没有仔细看，你很可能疏忽了没有看到。否则的话你就检查你前 ...

RNA 白色的透明，是白色，还是透明？...第一次做的时候得到的好像是类似DNA那样的白色沉淀，我以为RNA也是那样的呢
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6楼2011-11-14 08:23:10
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lvye3707

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by longrna at 2011-11-13 14:18:37:
产量低或都没有产量就看不到呗.....

可能的原因多了
物种、所用实验材料的量、提取方法、实验操作

不过如果是看不到沉淀这种情况往下的操作得非常小心小心翼翼，不然一不小心就把RNA弄丢了...

嗯，谢谢了...
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7楼2011-11-14 08:24:00
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lvye3707

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dreamshaker at 2011-11-14 00:17:06:
LiCl沉淀RNA，DNA却留在溶液中，至于为什么没有看到沉淀RNA，可能是你小提吧，取材比较少，RNA通常是白色的透明，离过心之后会在管底，量当然是很少了，没有仔细看，你很可能疏忽了没有看到。否则的话你就检查你前 ...

RNA 是不是不粘啊， 我轻轻一晃，rna 就掉下来了？ DNA需要使劲的弹~
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8楼2011-11-14 17:16:41
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dreamshaker

铜虫 (正式写手)
呵呵，你确定吗，我也用CTAB法提棉花的RNA，我的经验是棉花RNA可不容易从管壁上掉下来，我用LiCl悬浮和用75%的乙醇洗的时候RNA很难溶解，我必须用振荡器震荡好几分钟呢，不过我不知道材料不一样RNA的理化性质是否有所不同。
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踏踏实实，体会科研的乐趣
9楼2011-11-15 18:59:59
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spiritdaisy
10楼2011-11-15 20:07:54
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