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刘磊0730

新虫 (小有名气)

[求助] 肉鸡肠道粘膜提取RNA后跑胶

本人提取肉鸡肠道粘膜的总RNA后,用核酸定量为:浓度2000~3000ng/uL,
260:280=1.90~2.00,   260:230=1.0~1.5
但做琼脂糖凝胶电泳,做了2次结果都不太好,大家看看可能问题出在什么地方了,是不是降解很多?为什么会出现拖带现象呢?
注:我在样品中加入Trizol匀浆时用的是蒸馏水洗的刀头,没用DEPC处理水,是不是问题出在这了?
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本硕博连读

木虫 (小有名气)

只加油不够

西北农林科技大学的?
越努力越幸运。
2楼2012-07-19 17:14:29
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kevinelv

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
刘磊0730: 金币+1, 有帮助, 解决不了拖带问题 2012-07-20 21:47:28
总体来看还不错啊。

具体不详细。是不是考虑降低RNA浓度,
增加胶浓度,
长时间缓慢跑跑看?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

好歹咱也是个戴眼镜的==文化人呢
3楼2012-07-20 08:24:39
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刘磊0730

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 本硕博连读 at 2012-07-19 17:14:29
西北农林科技大学的?

是的,怎么了
4楼2012-07-20 21:27:11
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刘磊0730

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by kevinelv at 2012-07-20 08:24:39
总体来看还不错啊。

具体不详细。是不是考虑降低RNA浓度,
增加胶浓度,
长时间缓慢跑跑看?

嗯,好的,谢了
5楼2012-07-20 21:29:33
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本硕博连读

木虫 (小有名气)

只加油不够

引用回帖:
3楼: Originally posted by kevinelv at 2012-07-20 08:24:39
总体来看还不错啊。

具体不详细。是不是考虑降低RNA浓度,
增加胶浓度,
长时间缓慢跑跑看?

哈哈 猜猜我是谁
越努力越幸运。
6楼2012-07-21 09:10:57
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kevinelv

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我哪里猜得出你是谁?
好歹咱也是个戴眼镜的==文化人呢
7楼2012-07-21 13:37:41
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刘磊0730

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 本硕博连读 at 2012-07-21 09:10:57
哈哈 猜猜我是谁...

不好意思,让我猜到了,孙菲菲的说
8楼2012-07-23 17:31:47
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本硕博连读

木虫 (小有名气)

只加油不够

引用回帖:
8楼: Originally posted by 刘磊0730 at 2012-07-23 17:31:47
不好意思,让我猜到了,孙菲菲的说...

额……
越努力越幸运。
9楼2012-07-24 13:35:41
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gy313wyn

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyfgood: 金币+2, 应助指数+1, 欢迎多多交流! 2012-08-20 21:30:14
刘磊0730: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-24 10:59:08
说两句,虽然不一定对,做个参考吧。
看OD值的话你的RNA纯度还不错,之所以有拖尾现象可能是模板浓度太大了,可以进行适当稀释。另外琼脂糖的浓度和能够分离的片段大小也是有关的。我们一般用1.5%的,能分离300~6000
10楼2012-07-26 09:52:46
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