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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 肉鸡肠道粘膜提取RNA后跑胶
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刘磊0730

新虫 (小有名气)

[求助] 肉鸡肠道粘膜提取RNA后跑胶

本人提取肉鸡肠道粘膜的总RNA后，用核酸定量为：浓度2000~3000ng/uL,
260:280=1.90~2.00,   260:230=1.0~1.5
但做琼脂糖凝胶电泳，做了2次结果都不太好，大家看看可能问题出在什么地方了，是不是降解很多？为什么会出现拖带现象呢？
注：我在样品中加入Trizol匀浆时用的是蒸馏水洗的刀头，没用DEPC处理水，是不是问题出在这了？
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1楼 2012-07-18 20:36:04
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gy313wyn

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyfgood: 金币+2, 应助指数+1, 欢迎多多交流！ 2012-08-20 21:30:14
刘磊0730: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-24 10:59:08
说两句，虽然不一定对，做个参考吧。
看OD值的话你的RNA纯度还不错，之所以有拖尾现象可能是模板浓度太大了，可以进行适当稀释。另外琼脂糖的浓度和能够分离的片段大小也是有关的。我们一般用1.5%的，能分离300~6000
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10楼2012-07-26 09:52:46
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本硕博连读

木虫 (小有名气)

只加油不够
西北农林科技大学的？
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越努力越幸运。
2楼2012-07-19 17:14:29
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kevinelv

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
刘磊0730: 金币+1, ★有帮助, 解决不了拖带问题 2012-07-20 21:47:28
总体来看还不错啊。

具体不详细。是不是考虑降低RNA浓度，
增加胶浓度，
长时间缓慢跑跑看？
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刘磊0730
好歹咱也是个戴眼镜的==文化人呢
3楼2012-07-20 08:24:39
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刘磊0730

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 本硕博连读 at 2012-07-19 17:14:29
西北农林科技大学的？

是的，怎么了
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4楼2012-07-20 21:27:11
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