[求助] RNA电泳条带问题？

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好好做实验，毕业找份好工作！

1楼2013-07-15 11:05:21

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longrna

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A: 28S B:18S D:5S （C为一些其他的RNA）
主要是因为上样量过多导致现在分开不明显的现象，建议减少上样量（可减少至1/3），即可跑出明显三条主带的RNA电泳图。
电泳条件：7-8V/cm，电泳20-30min，1.2-1.5%胶，新鲜配制电泳缓冲液。

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伟大航线....

3楼2013-07-15 11:54:17

longrna

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引用回帖:

4楼: Originally posted by hyphen007 at 2013-07-15 12:00:00
如果A28 B18的话，咋看着不像2：1啊，？

点样量太多影响亮度比。
平时没事拿些无用的RNA点个梯度一跑即可发现上样量多的时候跑出来就长这个样子。A就是28S

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6楼2013-07-15 16:28:51

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cicelyzh

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-17 00:53:52

从植物叶片里提RNA会有更多的带，因为叶片里含有大量叶绿体，所以不仅有真核生物的28S,18S, 5S，还有原核属性的23S, 16S, 5S。在没有marker的情况下，具体你的条带对应什么不是很好说。看rRNA完整情况主要是看28S/18S，如果果亮度大致为2:1，说明RNA的完整性好.

2楼2013-07-15 11:42:20

hyphen007

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无花草: 金币+1 2013-07-15 15:08:56

如果A28 B18的话，咋看着不像2：1啊，？

4楼2013-07-15 12:00:00

hyphen007

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无花草: 金币+1 2013-07-15 15:09:01

marker呢？没有marker不好说，也许B28，C18？不懂，瞎说的，见谅啊

5楼2013-07-15 12:01:16

grape_vine

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没有marker还是不行,用dl2000,结果可能就清晰很多,这个图,大家还不好下结论说谁是谁.

7楼2013-07-15 22:10:37

hardytam

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减少上样量，再试下，28s比18s亮1.5倍以上，证明RNA 比较好。

8楼2013-07-16 11:53:18

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6楼: Originally posted by longrna at 2013-07-15 16:28:51
点样量太多影响亮度比。
平时没事拿些无用的RNA点个梯度一跑即可发现上样量多的时候跑出来就长这个样子。A就是28S...

嗯，什么时候试试！谢谢！

好好做实验，毕业找份好工作！

9楼2013-07-16 18:02:08

shucanwei

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按我的经验，估计不行！

唯以一人治天下，不以天下奉一人。

10楼2013-07-17 00:19:44