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sadam

银虫 (小有名气)

[求助] 请大家看下我的RNA电泳图

这是我的电泳图 大家帮忙看下提的RNA质量怎么样
右面的4个泳道的
多谢了
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dhmdddd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-03 13:57:05
引用回帖:
4楼: Originally posted by sadam at 2012-08-03 10:27:44
怎么看出有DNA污染的?...

我们一般认为RNA条带上面的是DNA污染,你去除DNA以后上面的条带会消失。我们当时用的宝生物的DNAase I,去的效果还可以。另外蛋白污染你可以通过测定RNA的浓度时看出来。这个去了DNA后再跑胶看,测定浓度以后做反转。应该不需要重新提RNA。
上班族,学习ing……
7楼2012-08-03 10:58:39
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dhmdddd

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by sadam at 2012-08-03 11:08:18
多谢你啊 另外我想问下28s 18s 5s什么的我的为啥只有一个最亮的条带呢 最亮那个是什么呢...

你跑胶最亮的那个是18S,应该是28S最亮,5S条带最暗,你的这个和别人的不太一样,我也不知道是为什么你的是中间一条带最亮…你
上班族,学习ing……
9楼2012-08-03 11:41:29
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普通回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有DNA的污染,要用DNA酶去一下DNA的,你提的是原核的还是真核的?怎么感觉中间那条带那么亮,上面那条带反而不亮?我觉得做反转录应该可以~
上班族,学习ing……
2楼2012-08-02 21:06:08
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-03 13:56:52
可以做反转录,我以前做的时候,也出现过中间那条带比最上面的带亮的情况,但是不影响逆转录,但是你的RNA中有DNA污染,还有可能有蛋白污染,这个最好去除
3楼2012-08-02 22:10:20
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sadam

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dhmdddd at 2012-08-02 21:06:08
有DNA的污染,要用DNA酶去一下DNA的,你提的是原核的还是真核的?怎么感觉中间那条带那么亮,上面那条带反而不亮?我觉得做反转录应该可以~

怎么看出有DNA污染的?
4楼2012-08-03 10:27:44
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sadam

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jl860822 at 2012-08-02 22:10:20
可以做反转录,我以前做的时候,也出现过中间那条带比最上面的带亮的情况,但是不影响逆转录,但是你的RNA中有DNA污染,还有可能有蛋白污染,这个最好去除

怎么看出来的?另外怎么去除?
5楼2012-08-03 10:28:14
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sadam

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jl860822 at 2012-08-02 22:10:20
可以做反转录,我以前做的时候,也出现过中间那条带比最上面的带亮的情况,但是不影响逆转录,但是你的RNA中有DNA污染,还有可能有蛋白污染,这个最好去除

需要重新提取RNA么
6楼2012-08-03 10:30:05
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sadam

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by dhmdddd at 2012-08-03 10:58:39
我们一般认为RNA条带上面的是DNA污染,你去除DNA以后上面的条带会消失。我们当时用的宝生物的DNAase I,去的效果还可以。另外蛋白污染你可以通过测定RNA的浓度时看出来。这个去了DNA后再跑胶看,测定浓度以后做反转 ...

多谢你啊 另外我想问下28s 18s 5s什么的我的为啥只有一个最亮的条带呢 最亮那个是什么呢
8楼2012-08-03 11:08:18
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sadam

银虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by dhmdddd at 2012-08-03 11:41:29
你跑胶最亮的那个是18S,应该是28S最亮,5S条带最暗,你的这个和别人的不太一样,我也不知道是为什么你的是中间一条带最亮…你...

那我的28s和5s在哪里?
10楼2012-08-03 14:26:46
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