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chenyinglc

金虫 (小有名气)


[交流] RNA电泳

我是体外转录合成RNA,但是用酚/氯仿抽提纯化之后,跑琼脂糖凝胶电泳,在RNA条带之上还有一条较暗的条带,怀疑是模板DNA,但是怎么都除不掉(已经加过DNase I,也增加了用量),请各位帮忙分析一下~~
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)



chenyinglc(金币+1):谢谢参与
你做胶回收后再跑一下
2楼2011-11-26 13:12:47
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jiaxu111

银虫 (小有名气)



chenyinglc(金币+1):谢谢参与
首先说明的一点是RNA会自我配对形成二级结构,那么如果是非变性胶,会出几个条带的。需要跑变性胶才能判断,另外体外转录有可能不是一个条带,比如T7经常会在末尾加上一两个碱基,电泳的时候也不容易分开。
3楼2011-11-26 14:04:41
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chenyinglc

金虫 (小有名气)


内容已删除
4楼2011-11-26 15:22:33
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nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)



chenyinglc(金币+1):谢谢参与
wanhscn: 请勿使用该表情,有误解! 2011-11-26 20:33:43
上图
5楼2011-11-26 15:32:45
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chenyinglc

金虫 (小有名气)


引用回帖:
5楼: Originally posted by nuoyaeva at 2011-11-26 15:32:45:
上图

这是什么意思?
6楼2011-11-26 16:13:11
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wenyuting

银虫 (小有名气)



chenyinglc(金币+1):谢谢参与
学习。
7楼2011-11-26 16:27:10
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zgykdxwuhui

铜虫 (小有名气)



chenyinglc(金币+1):谢谢参与
看不懂!
8楼2011-11-27 09:27:22
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papaya2011

新虫 (初入文坛)



chenyinglc(金币+1):谢谢参与
我也是做体外转录的,想请教一下你的片段有多长。用得什么试剂盒?
9楼2011-11-28 09:50:08
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nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)


引用回帖:
6楼: Originally posted by chenyinglc at 2011-11-26 17:13:11:
这是什么意思?


随便点的....
10楼2011-11-28 10:00:13
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lilyjimei

新虫 (小有名气)



chenyinglc(金币+1): 谢谢参与
我也在做体外转录,希望能了解下~~
11楼2012-06-04 22:01:55
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fuweilin2013

铁虫 (初入文坛)



chenyinglc(金币+1): 谢谢参与
你体外转录合成的RNA,跑琼脂糖凝胶电泳,有用RNA marker吗?
12楼2013-10-27 21:49:52
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neu234

木虫之王 (文学泰斗)



chenyinglc(金币+1): 谢谢参与
帮顶
14楼2013-10-28 09:27:33
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gwh212

新虫 (初入文坛)



chenyinglc(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
4楼: Originally posted by chenyinglc at 2011-11-26 15:22:33
谢谢大家,我把电泳图片贴出来,上面条带就是杂质条带,与模板位置一样,怀疑是模板DNA,但是除不去

RNA电泳图片

你好,我想请教一下,你的上样量是多少,条带这么亮,我跑出来的条带总是特别特别暗……
15楼2016-07-11 18:42:21
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简单回复
2013-10-27 23:22   回复  
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