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chenyinglc

金虫 (小有名气)

[交流] RNA电泳

我是体外转录合成RNA，但是用酚/氯仿抽提纯化之后，跑琼脂糖凝胶电泳，在RNA条带之上还有一条较暗的条带，怀疑是模板DNA，但是怎么都除不掉（已经加过DNase I，也增加了用量），请各位帮忙分析一下~~
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1楼 2011-11-26 11:15:20
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)
★
chenyinglc(金币+1):谢谢参与
你做胶回收后再跑一下
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2楼2011-11-26 13:12:47
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jiaxu111

银虫 (小有名气)
★
chenyinglc(金币+1):谢谢参与
首先说明的一点是RNA会自我配对形成二级结构，那么如果是非变性胶，会出几个条带的。需要跑变性胶才能判断，另外体外转录有可能不是一个条带，比如T7经常会在末尾加上一两个碱基，电泳的时候也不容易分开。
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3楼2011-11-26 14:04:41
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chenyinglc

金虫 (小有名气)
内容已删除
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4楼2011-11-26 15:22:33
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nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)
★
chenyinglc(金币+1):谢谢参与
wanhscn: 请勿使用该表情，有误解！ 2011-11-26 20:33:43
上图
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5楼2011-11-26 15:32:45
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chenyinglc

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by nuoyaeva at 2011-11-26 15:32:45:
上图

这是什么意思？
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6楼2011-11-26 16:13:11
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wenyuting

银虫 (小有名气)
★
chenyinglc(金币+1):谢谢参与
学习。
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7楼2011-11-26 16:27:10
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zgykdxwuhui

铜虫 (小有名气)
★
chenyinglc(金币+1):谢谢参与
看不懂！
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8楼2011-11-27 09:27:22
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papaya2011

新虫 (初入文坛)
★
chenyinglc(金币+1):谢谢参与
我也是做体外转录的，想请教一下你的片段有多长。用得什么试剂盒？
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9楼2011-11-28 09:50:08
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nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by chenyinglc at 2011-11-26 17:13:11:
这是什么意思？


随便点的....
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10楼2011-11-28 10:00:13
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lilyjimei

新虫 (小有名气)
★
chenyinglc(金币+1): 谢谢参与
我也在做体外转录，希望能了解下~~
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11楼2012-06-04 22:01:55
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fuweilin2013

铁虫 (初入文坛)
★
chenyinglc(金币+1): 谢谢参与
你体外转录合成的RNA，跑琼脂糖凝胶电泳，有用RNA marker吗？
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12楼2013-10-27 21:49:52
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neu234

木虫之王 (文学泰斗)
★
chenyinglc(金币+1): 谢谢参与
帮顶
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14楼2013-10-28 09:27:33
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gwh212

新虫 (初入文坛)
★
chenyinglc(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
4楼: Originally posted by chenyinglc at 2011-11-26 15:22:33
谢谢大家，我把电泳图片贴出来，上面条带就是杂质条带，与模板位置一样，怀疑是模板DNA，但是除不去

RNA电泳图片

你好，我想请教一下，你的上样量是多少，条带这么亮，我跑出来的条带总是特别特别暗……
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15楼2016-07-11 18:42:21
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yingying158813楼
2013-10-27 23:22   回复  
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