24小时热门版块排行榜    

查看: 1755  |  回复: 10

dhmdddd

木虫 (正式写手)

[求助] 请教分析RNA电泳图

新手啊,第一次提RNA,全部降解掉了,昨天第二次,总算是提出来了很是丑,但是还不要见笑……条带很暗,但是下边有一条带很亮,是蛋白质吗?我提的是大肠杆菌,一般菌体量要多少啊?请高手指教,先谢过了!!上图!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

上班族,学习ing……
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

★ ★
reasonspare(金币+2): 谢谢分享 2011-04-26 11:14:00
鼓励一下
谁都是从这个阶段开始的
万事开头难
加油
你会越来越NB的

下面的带如果你狠标准的按试剂盒老做的话
是蛋白的可能性不是很大
还是有可能是降解的RNA
虽然这话有点伤你的心
但是它确实有可能是降解的RNA
下一步要怎么样来防止RNA降解
如:枪头离心管什么要特别处理
提取的时候要带口罩
实验中注意仪器温度,RNA要存放在冰上并及时转移至-80冰箱等等
青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
2楼2011-04-26 09:39:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhmdddd(金币+2): 恩,十分感谢帮助,后面再提的话就知道了! 2011-04-26 11:07:22
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-04-26 22:23:33
下面很亮的带是降解掉的RNA吧
上面有两条弱弱的带,是28S和18S
自己用的提RNA的东西要注意,不用商品化的无RNASE的,就用DEPC处理吧
溶的时候也要注意,都要是无RNASE 的水...
还有就是操作了吧,该低温的要低温...
没了~~~
3楼2011-04-26 09:57:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


dhmdddd(金币+1): 谢谢! 2011-04-26 12:53:47
lstt09nk(金币+1): 感谢参与 2011-04-26 22:23:49
你的RNA都降解了,28S和18S很弱。你的操作还是有问题,器材或者试剂有RNA酶。还有蛋白不会跑到琼脂糖凝胶中,一般只会留在点样孔中。
4楼2011-04-26 12:28:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


dhmdddd(金币+1): 谢谢! 2011-04-26 12:56:55
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流,欢迎常来 2011-04-26 22:24:12
下面最亮的应该是5S,23S的亮度是16S亮度的两倍时质量比较好,但是比较难。一般只要5S不是很亮,16S和23S的亮度差不多就行了。大肠的话50ml的菌液我觉得就够了。
5楼2011-04-26 12:32:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by elvias at 2011-04-26 12:28:32:
你的RNA都降解了,28S和18S很弱。你的操作还是有问题,器材或者试剂有RNA酶。还有蛋白不会跑到琼脂糖凝胶中,一般只会留在点样孔中。

我们这边i没有专门提RNA的台子,所以就是在我们用的超净台里面做的,之前有拿75%的乙醇喷了一下,想着会好一点……枪头离心管什么的都拿DEPC泡过的,打开一次后又重新121度灭了30分钟,后面的话我 小心一点,感谢!
上班族,学习ing……
6楼2011-04-26 12:55:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2011-04-26 12:32:16:
下面最亮的应该是5S,23S的亮度是16S亮度的两倍时质量比较好,但是比较难。一般只要5S不是很亮,16S和23S的亮度差不多就行了。大肠的话50ml的菌液我觉得就够了。

我是10ml的菌液分了十管,之后就每管加试剂提了,后来也考虑到菌体量的原因了,你们的50ml分几管?现在看来还是降解比较厉害啊,后面再提的话我再把菌体量加大一点,感谢!
上班族,学习ing……
7楼2011-04-26 12:59:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linanyang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+10): 处女帖,鼓励发帖交流,欢迎常来生物综合版 2011-05-16 11:59:28
我最近也遇到这种情况啊,纠结中,共勉吧。加油!!
8楼2011-05-15 20:26:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

睡着数绵羊

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


silicare(金币+1): 鼓励发帖交流,欢迎常来生物综合版 2011-05-16 11:59:40
dhmdddd(金币+1): 这个装DEPC水的那个没有用DEPC泡,下次再试试看了,谢了! 2011-05-17 12:39:14
这个都要注意下细节问题:
1,装DEPC水的瓶子有没有用DEPC水泡
2,跑胶的时候枪头是不是用泡过的枪头吸的
现在就想到这2个方面。
9楼2011-05-16 10:37:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


silicare(金币+1): 鼓励发帖交流,欢迎常来生物综合版 2011-05-16 11:59:54
前面的是降解的小分子RNA,质量不太好,重来吧。
10楼2011-05-16 10:40:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dhmdddd 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 电池检测Sci 期刊推荐 +3 设置昵称不 2024-12-23 3/150 2024-12-23 20:40 by q74prt@q
[论文投稿] 污染物降解的矿化特性 +9 透明的心sky 2024-12-23 9/450 2024-12-23 20:34 by 湖边雪狼
[考博] 想找一位年轻的985博导 +7 艾弗森迪尔 2024-12-21 10/500 2024-12-23 20:33 by zeolitess
[论文投稿] International Journal of Biological Macromolecules 10+4 123smiles 2024-12-22 5/250 2024-12-23 20:09 by TopEdit
[基金申请] 大论文改改变成项目申请书 +6 wusiqi2020 2024-12-21 6/300 2024-12-23 17:28 by 星雨寒Mos
[教师之家] 如果评职称不需要国家自然基金,还会有人去申请吗? +3 akslis2024 2024-12-19 3/150 2024-12-23 16:00 by syl200707
[职场人生] 网络游戏有意义吗 +4 神明.斯派克. 2024-12-16 4/200 2024-12-23 15:15 by 开心就好56
[文学芳草园] 生活的意义 +5 宋昙 2024-12-20 5/250 2024-12-23 14:37 by yuan0806
[考博] 2025申博求助 +7 125814 2024-12-22 7/350 2024-12-22 17:07 by 毕生所学
[论文投稿] 投稿意见求助,没弄清回答的方向 8+4 moonlig 2024-12-18 4/200 2024-12-22 08:51 by steven_198377
[考博] 华南理工大学 “新能源交叉创新团队--主动安全”课题组招收海外联合培养博士生 +4 hubble 2024-12-20 5/250 2024-12-21 16:16 by 那片叶落
[教师之家] 今年的科研绩效只奖励Q1了 +12 holypower 2024-12-20 17/850 2024-12-21 16:13 by willbuilder
[教师之家] 学校排名靠前发展好,最大的受益者是校领导还是普通老师? +6 akslis2024 2024-12-17 7/350 2024-12-21 11:22 by 凌晨一点393
[有机交流] 工艺需求,付费 +4 想当然灬 2024-12-17 6/300 2024-12-21 06:23 by a893069456
[教师之家] 你们都降薪了吗? +10 红枣葡萄干 2024-12-18 10/500 2024-12-20 17:32 by 开心就好56
[考博] 有偿聘请兼职硕士 +10 大发财树 2024-12-19 10/500 2024-12-20 17:30 by mopsite
[论文投稿] 投稿投错期刊,怎么撤稿? 200+4 birrd 2024-12-17 8/400 2024-12-20 14:53 by yiran909
[教师之家] 某老师在组会上总是针对我带的学生怎么办? +15 lice_1987 2024-12-17 23/1150 2024-12-20 04:50 by 胖胖的大海
[论文投稿] 论文投稿 +4 @星尘@ 2024-12-17 6/300 2024-12-19 09:39 by YXLSYJK
[论文投稿] 申博 +3 翟某人 2024-12-16 3/150 2024-12-17 09:24 by xs74101122
信息提示
请填处理意见