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dhmdddd

木虫 (正式写手)

[求助] 请教分析RNA电泳图

新手啊,第一次提RNA,全部降解掉了,昨天第二次,总算是提出来了很是丑,但是还不要见笑……条带很暗,但是下边有一条带很亮,是蛋白质吗?我提的是大肠杆菌,一般菌体量要多少啊?请高手指教,先谢过了!!上图!!
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


dhmdddd(金币+1): 谢谢! 2011-04-26 12:53:47
lstt09nk(金币+1): 感谢参与 2011-04-26 22:23:49
你的RNA都降解了,28S和18S很弱。你的操作还是有问题,器材或者试剂有RNA酶。还有蛋白不会跑到琼脂糖凝胶中,一般只会留在点样孔中。
4楼2011-04-26 12:28:32
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

★ ★
reasonspare(金币+2): 谢谢分享 2011-04-26 11:14:00
鼓励一下
谁都是从这个阶段开始的
万事开头难
加油
你会越来越NB的

下面的带如果你狠标准的按试剂盒老做的话
是蛋白的可能性不是很大
还是有可能是降解的RNA
虽然这话有点伤你的心
但是它确实有可能是降解的RNA
下一步要怎么样来防止RNA降解
如:枪头离心管什么要特别处理
提取的时候要带口罩
实验中注意仪器温度,RNA要存放在冰上并及时转移至-80冰箱等等
青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
2楼2011-04-26 09:39:38
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mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhmdddd(金币+2): 恩,十分感谢帮助,后面再提的话就知道了! 2011-04-26 11:07:22
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-04-26 22:23:33
下面很亮的带是降解掉的RNA吧
上面有两条弱弱的带,是28S和18S
自己用的提RNA的东西要注意,不用商品化的无RNASE的,就用DEPC处理吧
溶的时候也要注意,都要是无RNASE 的水...
还有就是操作了吧,该低温的要低温...
没了~~~
3楼2011-04-26 09:57:06
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


dhmdddd(金币+1): 谢谢! 2011-04-26 12:56:55
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流,欢迎常来 2011-04-26 22:24:12
下面最亮的应该是5S,23S的亮度是16S亮度的两倍时质量比较好,但是比较难。一般只要5S不是很亮,16S和23S的亮度差不多就行了。大肠的话50ml的菌液我觉得就够了。
5楼2011-04-26 12:32:16
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