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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请大家看下我的RNA电泳图
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sadam

银虫 (小有名气)

[求助] 请大家看下我的RNA电泳图

这是我的电泳图 大家帮忙看下提的RNA质量怎么样
右面的4个泳道的
多谢了
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1楼2012-08-02 20:59:56
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dhmdddd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-03 13:57:05
引用回帖:
4楼: Originally posted by sadam at 2012-08-03 10:27:44
怎么看出有DNA污染的？...

我们一般认为RNA条带上面的是DNA污染，你去除DNA以后上面的条带会消失。我们当时用的宝生物的DNAase I,去的效果还可以。另外蛋白污染你可以通过测定RNA的浓度时看出来。这个去了DNA后再跑胶看，测定浓度以后做反转。应该不需要重新提RNA。
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上班族，学习ing……
7楼2012-08-03 10:58:39
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dhmdddd

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by sadam at 2012-08-03 11:08:18
多谢你啊 另外我想问下28s 18s 5s什么的我的为啥只有一个最亮的条带呢 最亮那个是什么呢...

你跑胶最亮的那个是18S，应该是28S最亮，5S条带最暗，你的这个和别人的不太一样，我也不知道是为什么你的是中间一条带最亮…你
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上班族，学习ing……
9楼2012-08-03 11:41:29
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普通回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有DNA的污染，要用DNA酶去一下DNA的，你提的是原核的还是真核的？怎么感觉中间那条带那么亮，上面那条带反而不亮？我觉得做反转录应该可以~
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上班族，学习ing……
2楼2012-08-02 21:06:08
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-03 13:56:52
可以做反转录，我以前做的时候，也出现过中间那条带比最上面的带亮的情况，但是不影响逆转录，但是你的RNA中有DNA污染，还有可能有蛋白污染，这个最好去除
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3楼2012-08-02 22:10:20
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sadam

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dhmdddd at 2012-08-02 21:06:08
有DNA的污染，要用DNA酶去一下DNA的，你提的是原核的还是真核的？怎么感觉中间那条带那么亮，上面那条带反而不亮？我觉得做反转录应该可以~

怎么看出有DNA污染的？
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4楼2012-08-03 10:27:44
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sadam

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jl860822 at 2012-08-02 22:10:20
可以做反转录，我以前做的时候，也出现过中间那条带比最上面的带亮的情况，但是不影响逆转录，但是你的RNA中有DNA污染，还有可能有蛋白污染，这个最好去除

怎么看出来的？另外怎么去除？
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5楼2012-08-03 10:28:14
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sadam

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jl860822 at 2012-08-02 22:10:20
可以做反转录，我以前做的时候，也出现过中间那条带比最上面的带亮的情况，但是不影响逆转录，但是你的RNA中有DNA污染，还有可能有蛋白污染，这个最好去除

需要重新提取RNA么
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6楼2012-08-03 10:30:05
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sadam

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by dhmdddd at 2012-08-03 10:58:39
我们一般认为RNA条带上面的是DNA污染，你去除DNA以后上面的条带会消失。我们当时用的宝生物的DNAase I,去的效果还可以。另外蛋白污染你可以通过测定RNA的浓度时看出来。这个去了DNA后再跑胶看，测定浓度以后做反转 ...

多谢你啊 另外我想问下28s 18s 5s什么的我的为啥只有一个最亮的条带呢 最亮那个是什么呢
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8楼2012-08-03 11:08:18
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sadam

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by dhmdddd at 2012-08-03 11:41:29
你跑胶最亮的那个是18S，应该是28S最亮，5S条带最暗，你的这个和别人的不太一样，我也不知道是为什么你的是中间一条带最亮…你...

那我的28s和5s在哪里？
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10楼2012-08-03 14:26:46
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