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1楼2012-08-02 20:59:56

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dhmdddd

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【答案】应助回帖

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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-03 13:57:05

引用回帖:

4楼: Originally posted by sadam at 2012-08-03 10:27:44
怎么看出有DNA污染的？...

我们一般认为RNA条带上面的是DNA污染，你去除DNA以后上面的条带会消失。我们当时用的宝生物的DNAase I,去的效果还可以。另外蛋白污染你可以通过测定RNA的浓度时看出来。这个去了DNA后再跑胶看，测定浓度以后做反转。应该不需要重新提RNA。

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上班族，学习ing……

7楼2012-08-03 10:58:39

dhmdddd

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8楼: Originally posted by sadam at 2012-08-03 11:08:18
多谢你啊另外我想问下28s 18s 5s什么的我的为啥只有一个最亮的条带呢最亮那个是什么呢...

你跑胶最亮的那个是18S，应该是28S最亮，5S条带最暗，你的这个和别人的不太一样，我也不知道是为什么你的是中间一条带最亮…你

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9楼2012-08-03 11:41:29

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dhmdddd

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

有DNA的污染，要用DNA酶去一下DNA的，你提的是原核的还是真核的？怎么感觉中间那条带那么亮，上面那条带反而不亮？我觉得做反转录应该可以~

上班族，学习ing……

2楼2012-08-02 21:06:08

jl860822

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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-03 13:56:52

可以做反转录，我以前做的时候，也出现过中间那条带比最上面的带亮的情况，但是不影响逆转录，但是你的RNA中有DNA污染，还有可能有蛋白污染，这个最好去除

3楼2012-08-02 22:10:20

sadam

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2楼: Originally posted by dhmdddd at 2012-08-02 21:06:08
有DNA的污染，要用DNA酶去一下DNA的，你提的是原核的还是真核的？怎么感觉中间那条带那么亮，上面那条带反而不亮？我觉得做反转录应该可以~

怎么看出有DNA污染的？

4楼2012-08-03 10:27:44

sadam

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3楼: Originally posted by jl860822 at 2012-08-02 22:10:20
可以做反转录，我以前做的时候，也出现过中间那条带比最上面的带亮的情况，但是不影响逆转录，但是你的RNA中有DNA污染，还有可能有蛋白污染，这个最好去除

怎么看出来的？另外怎么去除？

5楼2012-08-03 10:28:14

sadam

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需要重新提取RNA么

6楼2012-08-03 10:30:05

sadam

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7楼: Originally posted by dhmdddd at 2012-08-03 10:58:39
我们一般认为RNA条带上面的是DNA污染，你去除DNA以后上面的条带会消失。我们当时用的宝生物的DNAase I,去的效果还可以。另外蛋白污染你可以通过测定RNA的浓度时看出来。这个去了DNA后再跑胶看，测定浓度以后做反转 ...

多谢你啊另外我想问下28s 18s 5s什么的我的为啥只有一个最亮的条带呢最亮那个是什么呢

8楼2012-08-03 11:08:18

sadam

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9楼: Originally posted by dhmdddd at 2012-08-03 11:41:29
你跑胶最亮的那个是18S，应该是28S最亮，5S条带最暗，你的这个和别人的不太一样，我也不知道是为什么你的是中间一条带最亮…你...

那我的28s和5s在哪里？

10楼2012-08-03 14:26:46