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小小_木虫

木虫 (小有名气)

[求助] 细菌RNA电泳结果图

自己尝试提了一下细菌的RNA,提出来之后就直接在平时跑DNA的电泳槽中100v,30min跑了一下(缓冲液和胶都是平时用的,条件限制没换),也不太会看,请教高手们提的怎么样,最下面的是不是5s?太亮的话是不是降解严重呢?帮忙分析一下是不是可以用于下一步的RT-PCR,谢谢!
RNA.jpg(23.12KB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DdTtWujqUAQA2bc?p=130497
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小小_木虫: 金币+5, ★★★很有帮助, 非常感谢您的指导 2013-01-08 08:49:25
降解的确很严重。23S:16S的比例差,5S太亮。点样孔有点亮,有蛋白污染。当然,降解也有可能是电泳时造成的。你可以试试用新换的电泳缓冲液,跑短一点时间看看。做RT的话对RNA的要求不是特别严格,稍微有点降解还是可以用的。不过我觉得你的这种样品重复性可能不好,最好重新提。
2楼2013-01-08 08:38:37
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

你电泳的时间太长了,5s亮肯定是降解了,不过做一般的rt应该还行

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

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3楼2013-01-08 12:01:34
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小小_木虫

木虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by Fleaves at 2013-01-08 12:01:34
你电泳的时间太长了,5s亮肯定是降解了,不过做一般的rt应该还行

是吧,谢谢了,第一次提不知道哪里该注意些,整个过程弄的神经兮兮的
4楼2013-01-08 14:45:52
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