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wkl1984

金虫 (小有名气)

[求助] RNA非变性琼脂糖电泳

由于实验室没有专用的RNA的电泳槽设备,问一下大家如何来做RNA非变性琼脂糖电泳的?能不能那跑DNA用的电泳槽来做?如何配置非变性琼脂糖?结果如何?
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cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

wkl1984(金币+1): 2011-05-04 12:21:45
完全可以

话说当年有个师兄带本科实验,depc水忘配了,直接拿自来水整的,也出来了。。狂汗
5楼2011-05-03 21:56:06
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普通回帖

bluepapa

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

2楼2011-04-30 11:29:40
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wkl1984

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by bluepapa at 2011-04-30 11:29:40:
直接用跑DNA的条件,跑快点就行

麻烦看一下这张电泳图,是在跑DNA的电泳缓冲液和1%的琼脂糖电泳RNA,结果如下图,这样的结果能不能做RT?

3楼2011-04-30 12:26:03
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yangqq8282

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 不错 2011-05-03 13:27:26
把跑DNA的电泳槽消毒一下可以跑RNA
DEPC水消毒
4楼2011-05-03 11:01:59
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shengwumang

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wkl1984(金币+1): 2011-05-06 09:39:17
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-07 08:39:22
我就是用的DNA电泳槽跑的RNA电泳只是电泳液是新配的
迷茫中
6楼2011-05-06 09:26:01
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xjntmy42

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

wkl1984(金币+1): 2011-05-06 09:39:25
高温变性一下,跑,带子会很漂亮。
7楼2011-05-06 09:28:03
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wkl1984

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xjntmy42 at 2011-05-06 09:28:03:
高温变性一下,跑,带子会很漂亮。

怎么高温变性?是要高温灭菌吗?
8楼2011-05-06 09:40:15
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

【答案】应助回帖

★ ★
wkl1984(金币+1): 2011-05-06 20:19:15
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-07 08:39:34
用NAOH浸泡30min,再用H2O2浸泡,depc水冲洗,条件合适的话可以在凝胶中加入甲醛,这是目前步骤最多的方法!
Tobeornottobe,that'saproblem
9楼2011-05-06 17:50:47
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dcb005

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-07 08:39:44
wkl1984(金币+1): 2011-05-07 13:43:00
太繁琐了,我都是直接倒掉DNA buffer,之后放上甲醛胶跑。只要提的过程中没问题,跑出条带很好看,5s看很清楚。RNA 没想象那么娇气
★穷则独善其身,达则兼济天下★
10楼2011-05-06 22:00:46
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