| 查看: 3982 | 回复: 3 | ||
soffy0214铜虫 (小有名气)
|
[求助]
植物RNA提取电泳图，求解析！
|
植物RNA提取电泳图，求解析！提了很长时间，不是多条带就是边缘模糊带，不知道是降解还是电泳条件和胶没制好？以前我用氯仿只抽提一次，发现带很亮，而且有五条，后来就用氯仿抽提两次，出现三条带，可是边缘模糊。好像我一直以来跑的电泳带都是比较模糊的，不知道是什么原因？ [ Last edited by soffy0214 on 2012-7-10 at 21:54 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有50人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- RNA电泳图 好奇怪 什么原因呀
已经有18人回复
- trizol法手提虾肠道RNA电泳图，求分析
已经有12人回复
- 植物RNA提取后电泳检测
已经有16人回复
- 提取RNA电泳上样量
已经有21人回复
- 请好心虫友帮我分析一下rna电泳图，谢谢啦。。。
已经有18人回复
- RNA电泳结果分析
已经有11人回复
- 昆虫RNA 提取！电泳图，看不懂！请高手指点！
已经有9人回复
- 求高手指点RNA电泳图~~~~
已经有25人回复
- 请请各位帮忙分析一下我的RNA电泳图
已经有6人回复
- 请帮忙分析一下RNA电泳图
已经有8人回复
- RNA电泳条带滞后？
已经有5人回复
- 【求助/交流】帮我看看假丝酵母总RNA提取电泳图
已经有7人回复
- 【求助/交流】RNA电泳带
已经有25人回复
- 【求助/交流】帮我分析一下RNA电泳图
已经有20人回复
lele1983
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1600.6
- 帖子: 172
- 在线: 91.5小时
- 虫号: 433730
- 注册: 2007-08-18
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
2楼2012-07-10 22:29:08
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+5, 鼓励积极应助，解答问题 2012-07-13 16:16:00
soffy0214: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2012-07-13 19:32:59
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+5, 鼓励积极应助，解答问题 2012-07-13 16:16:00
soffy0214: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2012-07-13 19:32:59
| 看你的电泳结果，RNA没有问题的。感觉是电泳跑的不太好条带模糊。像是电泳液缓冲能力不太好，不知道是不是电泳液不新鲜导致。另外，你所说的5条带这里没有图就看不出来到底是怎么回事。RNA只要不降解，做一般实验是没有问题的。你的胶看起来是普通的胶，没有加变性剂，加入变性剂后，很容易看到28S是18S的两倍的关系，更加可以确定没有降解发生。如果实在不放心，可以再测一下OG，260/280如果在1.8到2.0之间就没有问题。超过2.0说明还是有降解。还有就是据我个人的经验，植物组织RNA不需要多次用氯仿抽提，因为氯仿在这里的作用，一个是去除痕量酚，另外要去除脂质，第三个作用就是增大有机相的比重，在实验中没有意外发生，抽提一次足矣。希望对你有帮助 |
3楼2012-07-13 10:16:31
dingxiuying
木虫 (正式写手)
- 应助: 29 (小学生)
- 金币: 1841.7
- 红花: 4
- 帖子: 796
- 在线: 102.9小时
- 虫号: 1211910
- 注册: 2011-02-24
- 专业: 作物生理学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-07-13 16:16:11
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-07-13 16:16:11
|
我跑过的RNA三条带或五条带的都有，因为组织中有叶绿体或线粒体的RNA也被提取出来了。不论几条带，判断标准是一样的，只要28S和18s两条带比较清晰，且亮度比接近1:1或2:1，而最小的5s比较弱的话，说明RNA提取质量还可以，再配合OD值来判断，就能确定RNA是否可用于后续试验。 楼主的电泳极有可能是胶的问题，建议重新配制电泳buffer和胶试试。另外，RNA电泳不能跑太长时间，指示剂移出加样孔大约2-3cm就可以看胶了，时间太长容易模糊，电压不能太大，4-5V/cm胶长就行。 |
4楼2012-07-13 14:02:42
40