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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE 电泳蛋白分子量飘移
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丫头7976

铜虫 (正式写手)

[交流] SDS-PAGE 电泳蛋白分子量飘移

各位大侠好：最近跑SDS-PAGE出现了一点问题， 我的蛋白分子量大小45KD，但是电泳时与marker相比却在44K和29KD之间 ，如果靠近44k也就算了 但是离44k还挺远的，请问各位有谁遇到过这种情况吗 这与蛋白的结构以及等电点等因素有什么关系吗 谢谢指教
浓缩胶不就是把不同样品压在一条起跑线上，一起开始电泳，跑出的蛋白条带只和蛋白分子量大小有关，与形状无关 ，为啥我的大小却跟marker不一致呢 纠结 郁闷 求解释
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1楼 2011-12-23 22:47:18
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回帖置顶 ( 共有1个 )

ecolibl21

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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silicare(金币+3, BioEPI+1): 鼓励发帖交流 2012-01-31 13:03:55
观察：
1你的电泳缓冲液是否正确？不同的电泳缓冲液marker可能不一样，同一种电泳缓冲液稀释倍数不同也许也不一样。
2胶是否正确。如上面仁兄所言
3样品处理的问题，如果降解可能会出现偏小的问题。另外，请确定你的样品就是需要的目的蛋白。
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7楼2012-01-16 15:12:56
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510332707

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+1): 鼓励发帖交流 2012-01-31 13:03:19
是不是你的蛋白发生了降解？用你的样品和别人的样品一起跑个电泳，看看别人的样分子量能不能对上，如果对上了，那就是你样品的问题，如果他的也没有对上，那就是胶的问题
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2楼2011-12-24 18:23:45
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普通回帖

baodongq

禁虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+1): 鼓励发帖交流 2012-01-31 13:03:30
本帖内容被屏蔽
3楼2011-12-25 09:29:06
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zhen_fang

银虫 (正式写手)
能帖张图片不》这样更看得清
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4楼2011-12-25 17:59:00
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
感觉不是绝对的简单线性关系吧
何况每次电泳的结果都有差别
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5楼2011-12-27 20:33:25
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
45分子量哪来的？文献？难道有糖基化的问题？
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6楼2012-01-10 12:56:38
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bilon17.org

新虫 (初入文坛)
silicare: 楼上是七楼 2012-01-31 13:04:25
同意六楼的观点
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8楼2012-01-16 15:40:56
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hxs-520

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+3): 鼓励发帖交流 2012-01-31 13:04:33
样品处理的问题可能性比较大。
一般情况，如果胶有问题，marker也同样有问题。
但是如果maker给的图与说明书一致，那可能就是电泳之外的问题。
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9楼2012-01-19 06:44:01
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zzjzheng

禁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
10楼2012-03-03 21:28:33
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丫头7976

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by zzjzheng at 2012-03-03 21:28:33:
请问楼主的问题有没有得到答案啊，我也遇到同样的问题，求解???

没有得到解决还在疑虑中
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11楼2012-03-03 21:53:54
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396101466

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
建议你跑个Native的试试，这样就知道了！
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12楼2012-03-05 12:24:51
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xiaobai白

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问这个问题是否解决了呢？我的实验也是这个问题
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13楼2013-04-17 19:56:34
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