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丫头7976

铜虫 (正式写手)


[交流] SDS-PAGE 电泳蛋白分子量飘移

各位大侠好:最近跑SDS-PAGE出现了一点问题, 我的蛋白分子量大小45KD,但是电泳时与marker相比却在44K和29KD之间 ,如果靠近44k也就算了 但是离44k还挺远的,请问各位有谁遇到过这种情况吗 这与蛋白的结构以及等电点等因素有什么关系吗 谢谢指教
浓缩胶不就是把不同样品压在一条起跑线上,一起开始电泳,跑出的蛋白条带只和蛋白分子量大小有关,与形状无关 ,为啥我的大小却跟marker不一致呢 纠结 郁闷 求解释
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ecolibl21

银虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+3, BioEPI+1): 鼓励发帖交流 2012-01-31 13:03:55
观察:
1你的电泳缓冲液是否正确?不同的电泳缓冲液marker可能不一样,同一种电泳缓冲液稀释倍数不同也许也不一样。
2胶是否正确。如上面仁兄所言
3样品处理的问题,如果降解可能会出现偏小的问题。另外,请确定你的样品就是需要的目的蛋白。
7楼2012-01-16 15:12:56
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510332707

金虫 (小有名气)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+1): 鼓励发帖交流 2012-01-31 13:03:19
是不是你的蛋白发生了降解?用你的样品和别人的样品一起跑个电泳,看看别人的样分子量能不能对上,如果对上了,那就是你样品的问题,如果他的也没有对上,那就是胶的问题
2楼2011-12-24 18:23:45
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普通回帖

baodongq

禁虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+1): 鼓励发帖交流 2012-01-31 13:03:30
本帖内容被屏蔽

3楼2011-12-25 09:29:06
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zhen_fang

银虫 (正式写手)


能帖张图片不》这样更看得清
4楼2011-12-25 17:59:00
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★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
感觉不是绝对的简单线性关系吧
何况每次电泳的结果都有差别
5楼2011-12-27 20:33:25
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)


★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
45分子量哪来的?文献?难道有糖基化的问题?
6楼2012-01-10 12:56:38
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bilon17.org

新虫 (初入文坛)


silicare: 楼上是七楼 2012-01-31 13:04:25
同意六楼的观点
8楼2012-01-16 15:40:56
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hxs-520

金虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+3): 鼓励发帖交流 2012-01-31 13:04:33
样品处理的问题可能性比较大。
一般情况,如果胶有问题,marker也同样有问题。
但是如果maker给的图与说明书一致,那可能就是电泳之外的问题。
9楼2012-01-19 06:44:01
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zzjzheng

禁虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

10楼2012-03-03 21:28:33
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丫头7976

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
10楼: Originally posted by zzjzheng at 2012-03-03 21:28:33:
请问楼主的问题有没有得到答案啊,我也遇到同样的问题,求解???

没有得到解决还在疑虑中
11楼2012-03-03 21:53:54
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396101466

金虫 (正式写手)


★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
建议你跑个Native的试试,这样就知道了!
12楼2012-03-05 12:24:51
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xiaobai白

银虫 (小有名气)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问这个问题是否解决了呢?我的实验也是这个问题
13楼2013-04-17 19:56:34
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