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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE蛋白电泳条带问题
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mmbb

金虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE蛋白电泳条带问题

跑出来的蛋白条带有宽有窄，太难看了，什么问题？条带宽度应该和梳子的宽度一样才对吧。
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1楼 2011-04-26 10:07:49
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hqchlorella

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
mmbb(金币+5): 谢谢 2011-04-26 11:17:19
西瓜(金币+2): 鼓励 2011-04-26 20:20:17
一般来说跑出的条带应比梳孔稍宽一些 又宽又窄可能说明你的胶制得不好、不均匀；也可能是你样品上样量不一致所致。呵呵，供参考！
楼主最好把图贴出来，大家才好分析。
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风一样的汉子
2楼2011-04-26 10:29:14
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

mmbb(金币+5): 谢谢，再来看看 2011-04-26 11:18:35
应该是二楼所说的，上样量不均一造成的，你可以用上样缓冲液将上样量调到均一，此外如果想让电泳图好看的话，你可以在冰浴中电泳，这样跑出来的条带会比较好看
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3楼2011-04-26 10:41:36
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mmbb

金虫 (正式写手)
★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励上图 2011-04-26 20:20:53
引用回帖:
Originally posted by hqchlorella at 2011-04-26 10:29:14:
一般来说跑出的条带应比梳孔稍宽一些 又宽又窄可能说明你的胶制得不好、不均匀；也可能是你样品上样量不一致所致。呵呵，供参考！
楼主最好把图贴出来，大家才好分析。

分离胶12%，浓缩胶5%，应该可以分离的。标准蛋白跑得挺好的，但是样品条带太宽。上样量都是10μL。是不是和蛋白浓度有关呢？
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努力学习，好好工作，养家糊口
4楼2011-04-26 11:16:32
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): good 2011-04-26 20:21:06
引用回帖:
Originally posted by mmbb at 2011-04-26 11:16:32:
分离胶12%，浓缩胶5%，应该可以分离的。标准蛋白跑得挺好的，但是样品条带太宽。上样量都是10μL。是不是和蛋白浓度有关呢？

蛋白量太大了，如果你是蛋白纯化的话，这样的图是正常的，你可以给marker补齐10μL
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5楼2011-04-26 11:57:16
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hqchlorella

铜虫 (小有名气)
同意楼上！ 你的样品蛋白含量高 上样量太大了。
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风一样的汉子
6楼2011-04-26 13:03:49
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红薯姐姐

新虫 (小有名气)
★
小丹木木(金币+1): 鼓励积极发帖交流哦 2012-01-09 09:29:41
看上去你的点样孔是不是marker的能小点呢？插梳子要慢，保证没有气泡。拔梳子要轻，小心梳齿下面不齐。想想看，起跑线不一样，跑的结果一定是不平的。
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在婚姻的围城外，在感情的时差里
7楼2012-01-08 11:50:28
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diy患者

铁虫 (正式写手)
★
小丹木木(金币+1): 鼓励新虫积极发帖交流哦 2012-01-09 09:30:20
因为你的两个样品离子强度不同。

我以前用透析后的蛋白跑电泳，比你的夸张的多。这种情况发文章应该还可以吧，除非你老板太苛刻，你的电泳还算是很成功的。
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8楼2012-01-08 22:51:34
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