应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Tricine-SDS-PAGE电泳问题求助。急！！！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
131/2返回列表12下一页
查看: 2395  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

gaochaohui

新虫 (小有名气)

[求助] Tricine-SDS-PAGE电泳问题求助。急！！！

最近在做Tricine-SDS-PAGE电泳检测分子量在9KDa-15KDa的一种蛋白。我用的分离胶的浓度为15%，积层胶为3.9%。但是出现了一些问题。跑电泳时蛋白条带很宽，而且是越来越宽。跑完电泳后蛋白条带也不明显。这有可能是什么原因呢。另外，分离胶的浓度和蛋白的分子量大小有关系吗，积层胶和分离胶的浓度如何确定。跑Tricine-SDS-PAGE电泳需要注意哪些问题。如果直接用表达蛋白的菌体做电泳行吗？求知道虫友的指点一下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
结交天下有志“虫友”！！！
1楼 2011-07-19 18:00:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

【答案】应助回帖

gaochaohui(金币+1): 2011-07-22 10:45:25
gaochaohui(金币+1): 2011-08-01 10:35:52
gaochaohui(金币+1): 2011-08-15 16:59:55
引用回帖:
Originally posted by gaochaohui at 2011-07-19 18:52:29:
不好意思，没有图。跑电泳的时候蛋白条带没有聚集成一条很窄的条带。没跑预染marker。

没跑预染marker你何来的越跑越宽，你能在电泳过程中看到蛋白？
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-07-20 08:17:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

【答案】应助回帖

gaochaohui(金币+1): 2011-07-19 18:50:08
gaochaohui(金币+1): 2011-08-15 16:59:35
图呢？
很宽是什么意思？
跑预染marker了吗？
赞一下 回复此楼
2楼2011-07-19 18:39:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaochaohui

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-07-19 18:39:43:
图呢？
很宽是什么意思？
跑预染marker了吗？

不好意思，没有图。跑电泳的时候蛋白条带没有聚集成一条很窄的条带。没跑预染marker。
赞一下 回复此楼
结交天下有志“虫友”！！！
3楼2011-07-19 18:52:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-19 20:33:06
marker 跑的宽不？如果宽就是胶的问题，重新配一下配胶的试剂，着重看下PH值。如果不宽，那有可能是蛋白样品的问题，loadding buffer浓度对不对？
还有就是15%的胶想把蛋白条带压成线不容易，我这里也在跑，也是这样，但显影后蛋白条带还可以。15%的胶跑9-15kd的蛋白可以了。问下，你是直接染胶的吗？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-07-19 18:55:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子曰包子好吃

银虫 (小有名气)
没marker啊？那你怎么确定你的目的蛋白在哪个位置？？
赞一下 回复此楼
5楼2011-07-19 18:57:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaochaohui

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 子曰包子好吃 at 2011-07-19 18:55:59:
marker 跑的宽不？如果宽就是胶的问题，重新配一下配胶的试剂，着重看下PH值。如果不宽，那有可能是蛋白样品的问题，loadding buffer浓度对不对？
还有就是15%的胶想把蛋白条带压成线不容易，我这里也在跑，也是 ...

是直接染得。考马斯亮蓝G-250
赞一下 回复此楼
结交天下有志“虫友”！！！
6楼2011-07-19 19:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子曰包子好吃

银虫 (小有名气)
那会不会是好几条蛋白条带重叠在一起看起来条带很宽啊？
赞一下 回复此楼
7楼2011-07-19 19:23:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaochaohui

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 子曰包子好吃 at 2011-07-19 19:23:46:
那会不会是好几条蛋白条带重叠在一起看起来条带很宽啊？

应该不是啊。
回复此楼
结交天下有志“虫友”！！！
8楼2011-07-19 19:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gppwfh

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-07-20 15:00:36
gaochaohui(金币+2): 2011-07-22 10:45:48
gaochaohui(金币+2): 2011-08-01 10:36:15
gaochaohui(金币+1): 2011-08-15 17:00:01
我有时候也是条带很宽，但是染色后看着蛋白没啥异常。一般我们都忽略了，如果出现条带宽的话

我们分离胶一般都用10%或者12%。即使做tricine 也是
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-07-20 13:33:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gaochaohui 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求助071001调剂！！！ +3 黄守松 2026-04-05 4/200 2026-04-05 21:01 by barlinike
[考研] 277求调剂 数一104分 +6 瓶子PZ 2026-04-05 6/300 2026-04-05 20:38 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿电子科技大学085600材料与化工 329分求调剂 +10 Naiko 2026-04-04 10/500 2026-04-05 09:40 by sam3303
[考研] 301求调剂 +12 121. 2026-04-04 12/600 2026-04-05 09:00 by 来看流星雨10
[考研] 一志愿北京2，材料与化工308求调剂 +10 熊二想上岸 2026-04-04 10/500 2026-04-05 05:20 by houyaoxu
[考研] 295求调剂 +4 A你好研究生 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:46 by yu221
[考研] 301求调剂 +18 骆驼男人 2026-04-02 18/900 2026-04-04 20:33 by 蓝云思雨
[考研] 材料383求调剂 +5 郭阳阳阳成 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:06 by dongzh2009
[考研] 359求调剂 +7 hhhhaaaa$ 2026-04-04 7/350 2026-04-04 18:49 by imissbao
[论文投稿] 求文献 5+3 ys879651$ 2026-04-02 3/150 2026-04-04 17:22 by bobvan
[考研] 265求调剂 +20 梁梁校校 2026-04-01 21/1050 2026-04-04 00:38 by userper
[考研] 考研调剂 +3 15615482637 2026-04-03 3/150 2026-04-03 22:50 by ms629
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358 +4 cs0106 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:41 by 百灵童888
[考研] 生物学求调剂 +3 15064154688 2026-04-03 3/150 2026-04-03 10:28 by macy2011
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +15 秋二十二 2026-03-30 15/750 2026-04-03 10:19 by linyelide
[考研] 求调剂！生物与医药专硕 +4 逆转陆先生 2026-04-01 5/250 2026-04-03 08:33 by Jaylen.
[考研] 312求调剂 +4 赊月色 2026-04-02 5/250 2026-04-03 08:21 by fangshan711
[考研] 环境工程297分求调剂一志愿杭高院 +15 GENJIOW 2026-03-31 16/800 2026-04-02 17:56 by cyh—315
[考研] 377求调剂 +3 RASKIN 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:45 by zzchen2000
[考研] 求0861交通运输专硕or材料专硕调剂 +4 勒布朗@ 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:54 by 一只好果子?
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭