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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶浓度问题
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曲阿郎

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶浓度问题 已有9人参与

各位虫友，在下有些SDS-PAGE电泳问题想请教高人，我想做蛋白质KLH的电泳，因为KLH的分子量很大，我用6%的浓缩胶和10%的分离胶进行电泳，结果跑不动，想请教高人，这个浓缩胶和分离胶浓度多少合适，谢谢！
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集思广益
1楼 2011-03-17 20:20:04
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路人甲007

木虫 (正式写手)

小七
蛋白有多大
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与人玫瑰手有余香
2楼2011-03-17 20:28:30
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以继续降低分离胶的浓度至8%试试
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2011-03-17 20:34:35
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曲阿郎

新虫 (初入文坛)

KLH分子量

引用回帖:
Originally posted by 路人甲007 at 2011-03-17 20:28:30:
蛋白有多大

KLH分子量大约45万到好几百万，不知道确切的分子量
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集思广益
4楼2011-03-17 20:44:25
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 曲阿郎 at 2011-03-17 20:44:25:
KLH分子量大约45万到好几百万，不知道确切的分子量

450KDa 就已经很大了，几百万kDa就别想用SDS-PAGE来做了。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2011-03-17 21:13:15
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路人甲007

木虫 (正式写手)

小七
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
好大的蛋白啊 marker一般最大的都是100多K的吧  估计很难啊
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与人玫瑰手有余香
6楼2011-03-17 21:53:03
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这么大，SDS-PAGE能做吗？
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
7楼2011-03-17 22:03:44
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horsw

木虫 (正式写手)
分离胶5%，浓缩胶4%试一下，不行的话上琼脂糖凝胶了
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8楼2011-03-17 22:10:31
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lavender169

木虫 (正式写手)
★
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我见过的MARKER最大分子量是220的  几百万的分子量就是几千kD 45万的话也有450kD 估计你很难用SDS-PAGE  来跑   实在要跑的话就只能用梯度胶
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::::::::::::::::jusmine:::::::::::::::
9楼2011-03-29 15:45:22
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baohuhe

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你就试用7.5%的分离胶
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不知道的问一下
10楼2013-06-29 18:13:11
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