应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Tricine-SDS-PAGE电泳问题求助。急！！！
51/1返回列表
查看: 2253  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gaochaohui

新虫 (小有名气)

[求助] Tricine-SDS-PAGE电泳问题求助。急！！！

最近在做Tricine-SDS-PAGE电泳检测分子量在9KDa-15KDa的一种蛋白。我用的分离胶的浓度为15%，积层胶为3.9%。但是出现了一些问题。跑电泳时蛋白条带很宽，而且是越来越宽。跑完电泳后蛋白条带也不明显。这有可能是什么原因呢。另外，分离胶的浓度和蛋白的分子量大小有关系吗，积层胶和分离胶的浓度如何确定。跑Tricine-SDS-PAGE电泳需要注意哪些问题。如果直接用表达蛋白的菌体做电泳行吗？求知道虫友的指点一下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
结交天下有志“虫友”！！！
1楼 2011-07-19 18:00:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

【答案】应助回帖

gaochaohui(金币+1): 2011-07-22 10:45:25
gaochaohui(金币+1): 2011-08-01 10:35:52
gaochaohui(金币+1): 2011-08-15 16:59:55
引用回帖:
Originally posted by gaochaohui at 2011-07-19 18:52:29:
不好意思，没有图。跑电泳的时候蛋白条带没有聚集成一条很窄的条带。没跑预染marker。

没跑预染marker你何来的越跑越宽，你能在电泳过程中看到蛋白？
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-07-20 08:17:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

【答案】应助回帖

gaochaohui(金币+1): 2011-07-19 18:50:08
gaochaohui(金币+1): 2011-08-15 16:59:35
图呢？
很宽是什么意思？
跑预染marker了吗？
赞一下 回复此楼
2楼2011-07-19 18:39:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaochaohui

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-07-19 18:39:43:
图呢？
很宽是什么意思？
跑预染marker了吗？

不好意思，没有图。跑电泳的时候蛋白条带没有聚集成一条很窄的条带。没跑预染marker。
赞一下 回复此楼
结交天下有志“虫友”！！！
3楼2011-07-19 18:52:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-19 20:33:06
marker 跑的宽不？如果宽就是胶的问题，重新配一下配胶的试剂，着重看下PH值。如果不宽，那有可能是蛋白样品的问题，loadding buffer浓度对不对？
还有就是15%的胶想把蛋白条带压成线不容易，我这里也在跑，也是这样，但显影后蛋白条带还可以。15%的胶跑9-15kd的蛋白可以了。问下，你是直接染胶的吗？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-07-19 18:55:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭