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gaochaohui

新虫 (小有名气)

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[求助] Tricine-SDS-PAGE电泳问题求助。急！！！

最近在做Tricine-SDS-PAGE电泳检测分子量在9KDa-15KDa的一种蛋白。我用的分离胶的浓度为15%，积层胶为3.9%。但是出现了一些问题。跑电泳时蛋白条带很宽，而且是越来越宽。跑完电泳后蛋白条带也不明显。这有可能是什么原因呢。另外，分离胶的浓度和蛋白的分子量大小有关系吗，积层胶和分离胶的浓度如何确定。跑Tricine-SDS-PAGE电泳需要注意哪些问题。如果直接用表达蛋白的菌体做电泳行吗？求知道虫友的指点一下。

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结交天下有志“虫友”！！！

1楼2011-07-19 18:00:58

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gppwfh

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-07-20 15:00:36
gaochaohui(金币+2): 2011-07-22 10:45:48
gaochaohui(金币+2): 2011-08-01 10:36:15
gaochaohui(金币+1): 2011-08-15 17:00:01

我有时候也是条带很宽，但是染色后看着蛋白没啥异常。一般我们都忽略了，如果出现条带宽的话

我们分离胶一般都用10%或者12%。即使做tricine 也是

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10楼2011-07-20 13:33:15

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