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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE后面几条带弥散求助
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1jane1

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE后面几条带弥散求助

我跑的SDS-PAGE蛋白电泳  前几条带跑的不错 后面几条却弥散的严重   请教？胶的配方应该没有问题  因为有几块胶跑的还不错
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1楼2011-07-25 08:35:07
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ybs007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3, BioEPI+1): 鼓励应助 2011-07-25 20:38:09
这问题太朦胧了哦。条带弥散原因超级多啊。
1.样品。你的样品是如何处理的，如果盐含量过高也会造成弥散。蛋白含量如何，用的是多少倍的loadingbuffer。
2.电泳缓冲液。你的缓冲液用了多久，是否是回收的。
3.电压。怀疑是不是开始的电压太高了。
请着重注意一下电泳液和电压，尤其是电泳液，我曾经在这个上栽了好多跟头
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平生我自知
5楼2011-07-25 17:30:10
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普通回帖

子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问有图吗？发上来看看！！！
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2楼2011-07-25 09:27:25
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btx362237729

金虫 (正式写手)
上图啊 啊哈 我也学习一下
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人生最黑暗的时光终于过去了
3楼2011-07-25 13:43:27
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101202139

铜虫 (小有名气)
我的蛋白胶图上半部分还算比较清楚，下半部分就比较模糊或者称为弥散，到现在我也说不清楚那里出问题了。
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4楼2011-07-25 14:56:12
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1jane1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 子曰包子好吃 at 2011-07-25 09:27:25:
请问有图吗？发上来看看！！！

hh为比较正常的图片  样品都是同样处理方法 电压什么的也都一样
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6楼2011-07-26 08:50:45
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terry130

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1jane1(金币+2): 2011-07-26 15:25:23
引用回帖:
Originally posted by 1jane1 at 2011-07-26 08:50:45:
hh为比较正常的图片  样品都是同样处理方法 电压什么的也都一样



如果图中两块胶的配制完全一样，样品也一样的话，可以判断是你的电泳缓冲液部分失效了，buffer又不是很贵，不要用N次都不换，因小失大。
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摒气动方息，宁神心自明。
7楼2011-07-26 09:59:35
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1jane1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 101202139 at 2011-07-25 14:56:12:
我的蛋白胶图上半部分还算比较清楚，下半部分就比较模糊或者称为弥散，到现在我也说不清楚那里出问题了。

我的也是啊  很郁闷 我现在在怀疑电泳仪了
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8楼2011-07-26 14:32:43
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1jane1

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by terry130 at 2011-07-26 09:59:35:
如果图中两块胶的配制完全一样，样品也一样的话，可以判断是你的电泳缓冲液部分失效了，buffer又不是很贵，不要用N次都不换，因小失大。

那为什么 前两条带 比较清楚呢？
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9楼2011-07-26 14:35:15
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terry130

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 1jane1 at 2011-07-26 14:35:15:
那为什么 前两条带 比较清楚呢？

虽然我不能从原理上清楚的解释为什么上面的好，不过这种现象在我这里的学生中也出现过，buffer用太多次之后总是小分子量条带先出问题。。也许跟蛋白分子的电荷携带状态有关吧。
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摒气动方息，宁神心自明。
10楼2011-07-27 08:01:48
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