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尚慕寒

铜虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳时,只有泳道两边发亮,中间没有条带

如图,跑的是总RNA,在28S的地方,只有泳道两侧发亮,中间却没有条带。
应该不是降解的原因,因为之前质粒酶切的时候也遇到过这种情况,我把中间没有条带的地方切下来纯化之后,跑出来的条带是很亮的,所以中间不亮的地方实际有东西,但没有染上色。质粒的图不在手边,如果需要的话我下次发上来。请高手指点下有可能是什么情况,万分感谢。
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高山仰止,景行行止,虽不能至,心向往之。
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ybs007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是用多少V跑的? 感觉电压有点儿大呢
平生我自知
2楼2012-09-12 22:58:04
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无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不亮是因为浓度低的原因,好的条带就像你中间那条一样
3楼2012-09-13 00:03:51
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31569218

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个已经降解,重新提吧
爱之深痛之切
4楼2012-09-13 09:12:04
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shen_41745

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你跑胶出现这种弧形的带,一般来说,要么是你胶制的不均匀,要么是你的电泳缓冲液需要换啦!!!你没发现你的Marker也有这种现象吗!!!
5楼2012-09-13 12:39:58
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junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-13 14:35:56
尚慕寒: 回帖置顶 2012-09-15 08:45:15
尚慕寒: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 十分感谢,我把上样量做了一个梯度,然后加大了EB的用量,结果跑的胶图非常漂亮!感谢! 2012-09-15 08:46:42
提的RNA结果不错了,造成这个的原因是:上样量太多,核酸带的是负电核,而染色剂如EB带的是正电荷,电荷方向相反,如果样本量太多,则后面的条带容易出现这样的状况,解决办法:减少上样量。其它的都是正常的。
6楼2012-09-13 14:04:26
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zoopera

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
电压大了,把电压调低一些
7楼2012-09-14 16:46:32
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小叔叔的爱

新虫 (初入文坛)

我跑的回收,也是这种情况,咋个搞嘛
8楼2014-03-02 21:01:45
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吃啄木鸟

新虫 (初入文坛)

我的也这样啊
9楼2016-07-06 21:27:55
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Melody楊楊楊

新虫 (初入文坛)

您好!请问您知道原因了吗?我也遇到了好几次这样的现象,我认为不是降解,如果降解的话,不会在大小正确的地方出现膨大和亮边,所以目的条带还是在的,只是不知为何显示不出来,是浓度过高,染料有限,被同一泳道下面的那条带用完了吗,降低浓度是不是会好一些?
10楼2019-12-11 21:09:31
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