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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳的Marker为什么会出现“山”字样的条带
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Jesse.Goo

铁虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳的Marker为什么会出现“山”字样的条带

琼脂糖凝胶电泳的Marker为什么会出现“山”字样的条带（重新换过缓冲液，也重新换过新的Marker）,求解释？？？<具体请看下图>
我是提取一重组菌的质粒验证其是否丢失了质粒，其中第一、二道分别是一旧、一新的Marker，最右边的也是同一新换的Marker。我用的是1%的琼脂糖凝胶，点样量为5µL。

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要理解生活，需要往后看；要过好生活，必须往前看。
1楼2013-03-13 22:44:55
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回帖置顶 ( 共有1个 )

tianchi2952

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2013-03-27 13:40:09
gyesang: 回帖置顶 2013-04-27 14:42:41
质粒提取如果自己配试剂的话比较麻烦，时间长就不说，关键是操作步骤多，生物实验中特别是提取，步骤越少越好，步骤少损失就少，还有就是操作技术要相当好才能高产提取。
你这个胶跑的有问题，marker没有问题，跑胶的时候电压要稳定，胶板要放顺，还有就是跑的时候尽量让胶板不要动，有时候缓冲液过多胶板会漂走的，如果这都没有问题那就检查一下设备，电场不均匀也会导致异常的.....
希望能帮到你........
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益学善用
5楼2013-03-27 13:04:09
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熊大斌

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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可能胶配的有问题
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2楼2013-03-13 22:48:16
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wxl.1989822

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该不是胶的问题 旁边的跑的好好的 可能是你的Maker出问题了
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3楼2013-03-14 13:27:46
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Jesse.Goo

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wxl.1989822 at 2013-03-14 13:27:46
应该不是胶的问题 旁边的跑的好好的 可能是你的Maker出问题了

换过新的λ HindⅢMarker也不行。昨天把Marker65℃处理5分钟，在冰上放5分钟，点在中间跑的条带还行。可是第二次做酶切是同样处理，Marker还是不行，但是另一个Marker（DL2000）的条带跑的还行。另外，我感觉我提的质粒蛋白等杂质太多，用酚氯仿抽提了三次结果质粒没有了，抽提少了又拖带太长，怎么处理,听说点样前把样品水浴几分钟有效果吗？恳请赐教！！！O(∩_∩)O谢谢
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要理解生活，需要往后看；要过好生活，必须往前看。
4楼2013-03-16 09:11:10
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tianchi2952

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-11 21:39:25
建议使用试剂盒提取质粒，如果想要高浓度的质粒的话还有回收试剂盒可以用，这些个都是商品化的东西，还比较好用.....
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益学善用
6楼2013-03-27 13:05:30
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shabz

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-11 21:39:34
出现山峰形 不是maker吧 左边和最右边的marker 很正常
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7楼2013-09-11 20:39:44
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