应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求教一个关于SDS-PAGE电泳的问题（电泳条带的重影以及marker最后一条带跑不出来）
61/1返回列表
查看: 2444  |  回复: 5
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

月落星沉

银虫 (初入文坛)

[求助] 求教一个关于SDS-PAGE电泳的问题（电泳条带的重影以及marker最后一条带跑不出来）

我的蛋白电泳中出现一些不该出现的条带，像重影一样。
在marker（中间的条带），和样品（2边的条带）中都有出现，比正常条带要细一些，淡一些。所以现在搞不清样品的2条带是拖尾了还是2种蛋白。这种现象要如何消除？
（我用的是3%的浓缩胶，10%的分离胶，上样量10μl，电泳开始时电压80V，然后调到160V，大约1h。）
另外，marker应该是6条带，但只跑出了5条带，最下面12KDa的带不见了，最下面出现的长长的，颜色略深的带到底是什么啊？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

Biological

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2012-08-24 11:24:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-08-24 21:45:12
月落星沉: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-08-26 09:33:37
先说你的Marker的问题。最后一条带没有，是因为你跑胶的时间太长了Marker跑出去了。至于胶上面最后一条长长的带，是你电泳之后染色染上去的，正好在你电泳结束的地方。一般跑胶都会有，不用在意。

看你的样品和Marker在中间部位都有杂带，但是Marker的下方就没有。感觉应该不像是胶的问题。不过如果你不放心可以重新配置一块胶，再跑一次，如果还是出现这样的情况，基本可以断定为那是你的样品不纯，那些细小的条带是杂带。至于Marker，很有可能被污染了，你可以点一个新Marker对比一下。
赞一下 回复此楼
2楼2012-08-24 14:51:01
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Marker一般是已知分子量的蛋白质，为了易得，一般是重组表达的，纯化后混合成商品。为了节省成本，一般不会纯化得太纯，有细微杂带是很正常的。
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-08-24 17:44:13
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zq347597638

新虫 (小有名气)
问题不懂  踩踩
回复此楼
4楼2012-11-22 17:19:26
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

passion_jh

铜虫 (初入文坛)
将电压降低到120试试，跑的时间太久，marker跑出去了，当然少了一条了
赞一下 回复此楼
5楼2012-11-27 11:11:02
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lizhijiang

木虫 (著名写手)
可以肯定marker降解了。
赞一下 回复此楼
海上生明月，天涯共此时！
6楼2013-04-04 20:35:14
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 月落星沉 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭