应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于SDS-PAGE与双向电泳的请教
71/1返回列表
查看: 2295  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

菠萝蜜123

新虫 (小有名气)

[求助] 关于SDS-PAGE与双向电泳的请教

大家好，我是做双向的，师姐说 先说下SDS-PAGE，看有没有结果，现在做了很长时间的SDS-PAGE，但是效果都不大好，主要问题就是下面的图这样，两个图右二的样品孔里是marker，但是都没有跑出来，而且这些样品孔里好像都相互串了，但是带都没有跑出来，（跑的时候，看不到溴酚蓝的线，好像是晕染的好大一块，不是线）我的样品上样前在分光光度计测了，上样20μl（10μg),5×buffer混合的，加marker的时候，一加进去，加的孔的旁边就染上了，跑出来后，感觉好像每个孔里都有蛋白，但是我都是隔一个孔加个样的，怎么会跑出来是这个样子呢。

我主要是要做双向的，现在浪费了很多时间在SDS-PAGE上了，但是效果还不好！，那我能不能直接做双向呢，SDS-PAGE做的不好，会不会影响我后面做双向呢，所以想问问大家！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-04 16:16:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-08-04 17:21:59
菠萝蜜123(金币+9): 2011-08-06 13:07:47
不清楚你的电泳为什么会这样，你可以找个电泳做得好的同学跟他学习一下，看看自己哪里出问题了。
双向电泳其实就是做两次不同电流方向的电泳，如果第一向的PAGE没有做好，肯定会影响最后的分离效果！
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-08-04 16:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菠萝蜜123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jinkui960 at 2011-08-04 16:36:52:
不清楚你的电泳为什么会这样，你可以找个电泳做得好的同学跟他学习一下，看看自己哪里出问题了。
双向电泳其实就是做两次不同电流方向的电泳，如果第一向的PAGE没有做好，肯定会影响最后的分离效果！

这样啊    唉  那我再摸索摸索吧
赞一下 回复此楼
3楼2011-08-04 16:46:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

3205001995

新虫 (初入文坛)
★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-10-02 14:16:17
胶的配置有没有问题啊，还有样品加了SDS 后有没有煮一下，使蛋白变性啊
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-10-01 19:00:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子菜鸟

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励应助！ 2011-10-02 14:16:24
胶多凝一会儿，可能是凝的时间短。另外检查一下电极缓冲液有没有问题。跑胶的时候电流是不是过小。不知楼主用的是什么品牌的电泳槽？我有次用伯乐的电泳槽没加好内槽的缓冲液漏出去了，电泳自己停了，样品都扩散了。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-10-02 09:47:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellolin

金虫 (小有名气)
★
西瓜(金币+1): 有可能哦 2011-10-04 00:25:21
可能是你缓冲液的问题，蛋白都没跑动，说明胶上都没通电
赞一下(1人) 回复此楼
scienceguy
6楼2011-10-03 11:27:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小渔爱折腾

新虫 (初入文坛)
我也出现过这种情况，因为上样量太大了。你测下蛋白浓度，做个梯度上样试试。
赞一下 回复此楼
7楼2012-10-19 11:18:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 菠萝蜜123 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考！ +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 生物学调剂 +3 Surekei 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:31 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +6 梨花珞晚风 2026-03-17 6/300 2026-03-21 03:40 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国石油大学（华东） 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 289求调剂 +6 怀瑾握瑜l 2026-03-20 6/300 2026-03-20 20:30 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭