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菠萝蜜123

新虫 (小有名气)

[求助] 关于SDS-PAGE与双向电泳的请教

大家好,我是做双向的,师姐说 先说下SDS-PAGE,看有没有结果,现在做了很长时间的SDS-PAGE,但是效果都不大好,主要问题就是下面的图这样,两个图右二的样品孔里是marker,但是都没有跑出来,而且这些样品孔里好像都相互串了,但是带都没有跑出来,(跑的时候,看不到溴酚蓝的线,好像是晕染的好大一块,不是线)我的样品上样前在分光光度计测了,上样20μl(10μg),5×buffer混合的,加marker的时候,一加进去,加的孔的旁边就染上了,跑出来后,感觉好像每个孔里都有蛋白,但是我都是隔一个孔加个样的,怎么会跑出来是这个样子呢。

我主要是要做双向的,现在浪费了很多时间在SDS-PAGE上了,但是效果还不好!,那我能不能直接做双向呢,SDS-PAGE做的不好,会不会影响我后面做双向呢,所以想问问大家!


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3205001995

新虫 (初入文坛)

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-10-02 14:16:17
胶的配置有没有问题啊,还有样品加了SDS 后有没有煮一下,使蛋白变性啊
4楼2011-10-01 19:00:44
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