24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 2352  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

菠萝蜜123

新虫 (小有名气)

[求助] 关于SDS-PAGE与双向电泳的请教

大家好,我是做双向的,师姐说 先说下SDS-PAGE,看有没有结果,现在做了很长时间的SDS-PAGE,但是效果都不大好,主要问题就是下面的图这样,两个图右二的样品孔里是marker,但是都没有跑出来,而且这些样品孔里好像都相互串了,但是带都没有跑出来,(跑的时候,看不到溴酚蓝的线,好像是晕染的好大一块,不是线)我的样品上样前在分光光度计测了,上样20μl(10μg),5×buffer混合的,加marker的时候,一加进去,加的孔的旁边就染上了,跑出来后,感觉好像每个孔里都有蛋白,但是我都是隔一个孔加个样的,怎么会跑出来是这个样子呢。

我主要是要做双向的,现在浪费了很多时间在SDS-PAGE上了,但是效果还不好!,那我能不能直接做双向呢,SDS-PAGE做的不好,会不会影响我后面做双向呢,所以想问问大家!


回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子菜鸟

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励应助! 2011-10-02 14:16:24
胶多凝一会儿,可能是凝的时间短。另外检查一下电极缓冲液有没有问题。跑胶的时候电流是不是过小。不知楼主用的是什么品牌的电泳槽?我有次用伯乐的电泳槽没加好内槽的缓冲液漏出去了,电泳自己停了,样品都扩散了。
5楼2011-10-02 09:47:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖


1949stone(金币+1): 鼓励 2011-08-04 17:21:59
菠萝蜜123(金币+9): 2011-08-06 13:07:47
不清楚你的电泳为什么会这样,你可以找个电泳做得好的同学跟他学习一下,看看自己哪里出问题了。
双向电泳其实就是做两次不同电流方向的电泳,如果第一向的PAGE没有做好,肯定会影响最后的分离效果!
2楼2011-08-04 16:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菠萝蜜123

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jinkui960 at 2011-08-04 16:36:52:
不清楚你的电泳为什么会这样,你可以找个电泳做得好的同学跟他学习一下,看看自己哪里出问题了。
双向电泳其实就是做两次不同电流方向的电泳,如果第一向的PAGE没有做好,肯定会影响最后的分离效果!

这样啊    唉  那我再摸索摸索吧
3楼2011-08-04 16:46:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

3205001995

新虫 (初入文坛)

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-10-02 14:16:17
胶的配置有没有问题啊,还有样品加了SDS 后有没有煮一下,使蛋白变性啊
4楼2011-10-01 19:00:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22408 312求调剂 +16 门路摸摸 2026-04-14 17/850 2026-04-14 23:59 by Xurambo2014
[考研] 求调剂学校 +11 不会吃肉 2026-04-13 12/600 2026-04-14 19:38 by Art1977
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +7 lzmk 2026-04-14 7/350 2026-04-14 17:02 by lihaoda1994
[考研] 考研调剂 +13 长弓傲 2026-04-13 14/700 2026-04-14 14:44 by zs92450
[考研] 求调剂 +12 璃茉一定上岸 2026-04-10 13/650 2026-04-14 00:08 by Equinoxhua
[考研] 材料复试求调剂 +24 xhhdjdjsjks 2026-04-09 24/1200 2026-04-13 15:49 by 幸免 ..
[考研] 一志愿厦大生物学332求调剂 +11 池池池池池池 2026-04-08 11/550 2026-04-13 14:10 by 科研论
[考研] 322求调剂,08工科 +4 今天是个小号 2026-04-08 4/200 2026-04-13 00:20 by baobaoye
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 280求调剂 +7 兮兮夜夜 2026-04-09 10/500 2026-04-12 00:33 by 蓝云思雨
[考研] 267求调剂 +8 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:42 by cfdbai
[考研] 材料工程日语考生求调剂 +7 0856?调剂 2026-04-10 7/350 2026-04-11 21:33 by 蓝云思雨
[考研] 070300化学279求调剂 +19 哈哈哈^_^ 2026-04-08 20/1000 2026-04-11 20:43 by stoner78
[考研] 085400 328分 求调剂 +10 喂你一个大橙子 2026-04-09 14/700 2026-04-11 19:53 by lqspecial
[考研] 农学0904 312求调剂 +6 Say Never 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:33 by wwj2530616
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 本9 一志愿西工大085601 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-10 16:57 by luoyongfeng
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 复试调剂,一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
[考研] 086000生物与医药调剂 +7 awwwwwooooo 2026-04-09 7/350 2026-04-09 13:31 by 北极159263
信息提示
请填处理意见