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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】琼脂糖凝胶电泳的诅咒
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紫竹风

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】琼脂糖凝胶电泳的诅咒

最近做琼脂糖凝胶电泳，样品胶孔跑着跑着就破了（拔梳子时是完好的，胶也凝的很好，缓冲液也没问题），但Marker孔跑的条带却很清晰，胶孔也没破，结果就是UV下，Marker孔条带清晰，样品孔啥都没有（肯定是漏掉了）。。。前几个星期开始就开始这种受诅咒的命运了，这周一竟然奇迹般的没破，但从昨天起又开始了，为啥？这到底是为啥呢？大家帮帮我吧，谢谢啦
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1楼 2010-12-17 15:40:15
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susizheng

木虫 (著名写手)
★
紫竹风(金币+1):谢谢参与
看了半天没搞明白。
不知道是不是样品没条带，怀疑胶的点样孔破了的意思。
点样孔破没破，样品上样时，不是与loading buffer混合过嘛，漏不漏从槽子正面不可以看得很清楚嘛。
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2楼2010-12-17 16:07:33
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
紫竹风(金币+1):谢谢参与
呵呵，是不是用的不配套的梳子和模具啊？可以考虑将梳子下端用砂纸或者什么粗糙的东西磨掉一点，这样点样孔下端就厚实一点，拔梳子就不会破掉了。
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3楼2010-12-17 16:11:44
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feng__

金虫 (著名写手)
★
紫竹风(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-17 16:11:44:
呵呵，是不是用的不配套的梳子和模具啊？可以考虑将梳子下端用砂纸或者什么粗糙的东西磨掉一点，这样点样孔下端就厚实一点，拔梳子就不会破掉了。

maker没有异常，说明应该不是梳子太长的原因吧？
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4楼2010-12-17 16:19:31
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phoenix0

铁杆木虫 (正式写手)
★
紫竹风(金币+1):谢谢参与
是不是点样时出的问题？
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5楼2010-12-17 16:45:48
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★ ★
amisking(金币+2):good！ 2010-12-17 20:17:55
引用回帖:
Originally posted by feng__ at 2010-12-17 16:19:31:


maker没有异常，说明应该不是梳子太长的原因吧？

梳子的各个齿长短不一

不过诡异的是，胶孔是跑着跑着破的，一开始没破？

根据我跑基因组的经验，0.8%的胶，90-120V的电压，几分钟DNA就会跑出胶孔进入胶体的。

，太诡异了。

[ Last edited by brightfuture01 on 2010-12-17 at 16:52 ]
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6楼2010-12-17 16:50:02
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YaYa785

银虫 (小有名气)
★
紫竹风(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by feng__ at 2010-12-17 16:19:31:


maker没有异常，说明应该不是梳子太长的原因吧？

同意这个意见
还有就是 点样的时候枪头把胶扎破了....
另外胶硬了,在拔的时候容易裂开，有时候只有一点点缝也会漏样的....你拔梳子的时候在胶上面加一点缓冲液...
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7楼2010-12-17 16:53:43
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