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质粒PCR后琼脂糖凝胶电泳结果问题
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linglingyan
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质粒PCR后琼脂糖凝胶电泳结果问题
质粒PCR结果出现异常亮点,求解答
如图左起第四个
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【求助/交流】做过大引物全质粒PCR的进来看
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1楼
2012-05-31 17:28:55
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linglingyan
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专业: 微生物生理与生物化学
另外,条带比较模糊、宽,同求原因,谢谢
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2楼
2012-05-31 17:30:05
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哆啦B梦1024
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2012-06-04 13:42:59
可能是目的基因没有连接到质粒载体上,对照marker看看那个亮点的大小,是不是对应了哪个片段大小 感觉是连接可能有问题 延长连接的时间试一下 祝你实验顺利!
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3楼
2012-05-31 21:24:08
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l68266152
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专业: 微生物生理与生物化学
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胶里面的污染,是什么maker?如果是2000的话,应该是引物二聚体,要检查下引物的设计
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4楼
2012-06-01 08:46:58
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lihao1988903
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感觉可能是胶的的杂质吧,不然怎么是圆点呢。
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5楼
2012-06-04 13:25:33
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longrna
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专业: 生物化学
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西瓜: 金币+1, 鼓励交流
2012-06-04 19:00:00
可能是EB等染色的没有很好溶解分散在胶里。
重跑一次即可排除。
条带也很模糊,可能引物设计很不特异?
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伟大航线....
6楼
2012-06-04 16:29:09
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yaolinlshang
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专业: 色谱分析
有没有可能是你的Loading Buffer 被污染了,我同学的是这个原因。
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最是人间留不住,朱颜辞镜花辞树!
7楼
2012-06-04 16:36:14
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毛桃就是我
银虫
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专业: 微生物生理与生物化学
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溶胶加EB 没混匀吧 不然怎么是亮点
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木有签名呀!
8楼
2012-06-04 17:27:44
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