| 查看: 2817 | 回复: 20 | |||||
天使托专家顾问 (职业作家)
T.Shen
|
[交流]
【求助/交流】（5.20更新）PCR产物电泳没有条带，why? 已有10人参与
|
|
今天偶做了一个pcr，目的片段1800多bp，退火温度63，延伸2Min,不料做完之后电泳没有条带！不知道是何原因？ ps:100微升体系，10 buffer 5 DMSO 75 ddH2O dNTP 引物 模板 酶 都是2 没有加氯化钾，因为近来实验室都说加了氯化钾做不出来！ 请高手帮忙分析原因？ 还有我明天想做一个梯度，不知道设几个梯度好？还有如果做梯度的话，每一管做多少微升合适？ 谢谢高手了！ 5.20更新今天中午又去做了一个pcr，这次我做的是10微升体系的，分别用两种酶（鼎国的和pfu酶）各做了五个梯度，54 56 58 60 62度，结果下午去跑电泳还是没有任何条带，我考虑到是不是引物没有稀释均匀的问题，随后又对我的引物进行了电泳，点了5微升，有条带很亮！ 目前已经可以排除引物的问题（因为我引物设计完成后让师姐都检查了一下，而且今天也排除了引物稀释均匀的问题）； 现在我也不知道到底是什么问题了？大家有什么更好的建议没有？ 有哪位仁兄用过pcr增强剂? [ Last edited by 天使托 on 2010-5-20 at 18:45 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有11人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有109人回复
-
重要消息，中午系统在维护
已经有10人回复
-
两姐妹，一个辛辛苦苦30岁工作当大学教师，另一个23岁就工作当开车教练
已经有7人回复
-
明天放榜？
已经有4人回复
-
投稿咨询
已经有6人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有26人回复
-
今天维护系统维护 祝所有人 高中
已经有9人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有16人回复
-
2027广东省杰青
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请各位虫友帮我分析一下，为什么 我的DGGE没有条带呀！！！！！！！！！
已经有18人回复
- PCR电泳，加样孔很亮，但目的条带却很淡，不知道怎么回事？
已经有24人回复
- 3‘RACE inner PCR 电泳结果总是有弥散现象回收条带不成带状什么原因啊？
已经有17人回复
- 胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题
已经有8人回复
- 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物出现杂带
已经有16人回复
- PCR后凝胶电泳条带时有时无是怎么回事？
已经有5人回复
- 【求助/交流】PCR产物电泳条带弥散？？？
已经有30人回复
- 【求助/交流】pcr结果电泳条带很淡
已经有14人回复
- 【求助/交流】目的基因PCR后电泳出现多条带
已经有7人回复
scelab
荣誉版主 (文坛精英)
小木虫之有关部门负责人
- MicEPI: 5
- 应助: 63 (初中生)
- 贵宾: 1.475
- 金币: 8294.6
- 散金: 4158
- 红花: 39
- 沙发: 99
- 帖子: 21277
- 在线: 3169.3小时
- 虫号: 482065
- 注册: 2007-12-20
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
氯化钾
2楼2010-05-18 22:31:10
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MicEPI: 13
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16299.3
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3659
- 在线: 290.6小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
3楼2010-05-18 22:34:57
scelab
荣誉版主 (文坛精英)
小木虫之有关部门负责人
- MicEPI: 5
- 应助: 63 (初中生)
- 贵宾: 1.475
- 金币: 8294.6
- 散金: 4158
- 红花: 39
- 沙发: 99
- 帖子: 21277
- 在线: 3169.3小时
- 虫号: 482065
- 注册: 2007-12-20
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
4楼2010-05-18 22:36:47
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MicEPI: 13
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16299.3
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3659
- 在线: 290.6小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
5楼2010-05-18 22:42:45
scelab
荣誉版主 (文坛精英)
小木虫之有关部门负责人
- MicEPI: 5
- 应助: 63 (初中生)
- 贵宾: 1.475
- 金币: 8294.6
- 散金: 4158
- 红花: 39
- 沙发: 99
- 帖子: 21277
- 在线: 3169.3小时
- 虫号: 482065
- 注册: 2007-12-20
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
6楼2010-05-18 22:48:53
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MicEPI: 13
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16299.3
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3659
- 在线: 290.6小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
7楼2010-05-18 22:54:36
pan琳lin
木虫 (职业作家)
小木虫水军秘书长
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3334.2
- 散金: 403
- 红花: 12
- 沙发: 60
- 帖子: 4147
- 在线: 200.1小时
- 虫号: 962586
- 注册: 2010-03-05
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2010-05-18 23:02:12
9楼2010-05-18 23:05:46
scelab
荣誉版主 (文坛精英)
小木虫之有关部门负责人
- MicEPI: 5
- 应助: 63 (初中生)
- 贵宾: 1.475
- 金币: 8294.6
- 散金: 4158
- 红花: 39
- 沙发: 99
- 帖子: 21277
- 在线: 3169.3小时
- 虫号: 482065
- 注册: 2007-12-20
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
10楼2010-05-18 23:44:22
