应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 电泳的时候，总DNA跑出条带，PCR扩增后没有条带，都有什么原因啊
91/1返回列表
查看: 4619  |  回复: 8
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

暖阳ny2

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳的时候，总DNA跑出条带，PCR扩增后没有条带，都有什么原因啊已有5人参与

我用的是金黄色葡萄球菌，5%chelex-100作的裂解液，高温水煮方法提的DNA
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2014-04-23 19:28:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+1, good~ 2014-04-24 21:38:08
你这个问题太大了，首先你要确定一下你的DNA的质量，然后PCR的时候，有没有正对照？如果CK+是可以的，那么要考虑你的DNA质量了。
赞一下(1人) 回复此楼
致良知
2楼2014-04-23 20:58:32
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
影响PCR扩增结果原因多了，没有条带，就试着从源头找起，如引物特异性，体系，程序等。
赞一下(1人) 回复此楼
学习使你立于不败之地
3楼2014-04-23 21:11:47
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+1 2014-04-24 21:37:56
引物量，DNA浓度太高，PCR条件没弄好
赞一下(1人) 回复此楼
但行好事，莫问前程
4楼2014-04-24 09:34:40
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a188202881a

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是pcr体系没找好，或者是dna提纯不好

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-04-24 09:49:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xichun

新虫 (初入文坛)
多半和你的引物设计和量有关系，体系也可能有关系。
赞一下 回复此楼
6楼2014-04-24 10:19:13
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hgdcongcong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先跑电泳能出条带，请问条带位置正确吗？如果不正确，会不会是DNA制备过程中讲解了，或者其他原因导致DNA受损；如果条带位置正确，那么就很有可能是PCR体系环节有问题，比如使用的引物是否有效（特异性、合成引物本身的质量），扩增参数设置（退火温度是否合适、延伸时间是否足够）是否正确等等。
赞一下 回复此楼
7楼2014-04-24 16:47:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖阳ny2

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by hgdcongcong at 2014-04-24 16:47:12
首先跑电泳能出条带，请问条带位置正确吗？如果不正确，会不会是DNA制备过程中讲解了，或者其他原因导致DNA受损；如果条带位置正确，那么就很有可能是PCR体系环节有问题，比如使用的引物是否有效（特异性、合成引物 ...

谢谢哦，验证了下，应该是引物有问题
赞一下 回复此楼
8楼2014-05-05 11:28:09
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
常常遇到这种问题，换了试剂盒使用高保真Taq酶扩增，效果都不错
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
9楼2015-07-16 15:47:46
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 暖阳ny2 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭