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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR条带不清楚
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pipi8421

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR条带不清楚 已有10人参与

我的pcr电泳条带不清楚，开始时marker挺清楚的，后来marker的不清楚，而且加大量还是不清，eb的量也增加了，循环数增加了，仍然不清楚，不知道为什么，麻烦大家说说原因
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1楼 2010-04-22 10:00:07
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gn2003_0

金虫 (小有名气)
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-04-22 11:35
marker都不清楚，那有可能是电泳的问题了。
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2楼2010-04-22 10:23:35
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-04-22 11:35
配胶时候有什么问题，要不就是电泳的电压和时间的问题了~
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2010-04-22 10:49:02
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zhyzx

金虫 (小有名气)
★
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也有可能是你引物设计的问题吧
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4楼2010-04-22 10:56:58
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zhangzhuang

银虫 (初入文坛)
★ ★
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scelab(金币+1):欢迎多来交流！ 2010-04-22 11:38
marker都不清楚,配胶时候有问题
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5楼2010-04-22 11:15:10
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小小豆豆

金虫 (小有名气)
★
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maker都不清楚，那应该就是电泳的问题了，你应该从胶的配制，电泳时间，电压，缓冲液几个方面找一找问题。
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6楼2010-04-22 11:30:22
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gaiyf

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3): 2010-04-22 11:35
如果marker不清楚的话，很可能是电泳胶有问题，建议如下：配新的电泳胶，用新的缓冲液，说到这里，楼主还要检测一下电泳缓冲液。在点用的时候用新的电泳胶，性的电泳缓冲液。
我这里还有一些关于pcr的经验，有问题可以再问我。
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多看文献，多学知识
7楼2010-04-22 11:32:39
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bujunyang

木虫 (正式写手)

卓尔不群
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-04-22 12:47
制胶用新的TBE
电泳用新的TBE
试验找新手代替
最重要的是实验室就你一个人这样？
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来是偶然，去是必然。
8楼2010-04-22 12:25:30
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
…………照紫外你照了多久？
EB淬灭了吧，如果marker一开始很清楚然后越来越不清楚……
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9楼2010-04-22 13:05:16
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pipi8421

银虫 (初入文坛)
电压在138V-140V之间，不太稳定。电泳液用了有一个月了。EB一开始就不清楚，没在紫外下放太长时间。配胶的水，我用的是一次蒸馏水，是不是一定要用dd水？
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10楼2010-04-22 15:25:34
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