应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 巢式PCR后不是单一带
121/2返回列表12下一页
查看: 1460  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

[求助] 巢式PCR后不是单一带

做DGGE回收胶，回收胶后用不带夹子的引物用巢式PCR扩增，扩增片段约230bp，可扩出来的条带不单一，目的条带很亮，但上方像抹带，亮度没有目的条带亮，和目的条带相连，不知道是怎么回事？是程序设计上问题还是引物的问题呢？哎，郁闷。大家帮帮忙，我的PCR产物是要测序的，测不出来结果，我觉得是跟PCR产物的条带不单一有关。可也不知道咋办才好。求做DGGE方面的虫友QQ:303780897 http://good.gd/1394954.htm[/url]

[ Last edited by piaoyuaaa on 2011-7-13 at 15:42 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2011-07-13 15:35:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
那就切胶克隆测序呗。。。
赞一下 回复此楼
2楼2011-07-14 11:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyuaaa

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xp198766 at 2011-07-14 11:55:06:
那就切胶克隆测序呗。。。

切胶克隆测序？能不能说得具体点，谢谢！
赞一下 回复此楼
3楼2011-07-14 18:51:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
就是把你的目标带切胶，纯化，做克隆，再送去测序
赞一下 回复此楼
4楼2011-07-14 19:24:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyuaaa

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xp198766 at 2011-07-14 19:24:07:
就是把你的目标带切胶，纯化，做克隆，再送去测序

目标带与杂带相连，不知道切胶可以不？你们用的是试剂盒纯化的吗?没做过克隆，不会哦，想直接测序，不知道可以不？
赞一下 回复此楼
5楼2011-07-15 09:17:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
引用回帖:
Originally posted by piaoyuaaa at 2011-07-15 09:17:21:
目标带与杂带相连，不知道切胶可以不？你们用的是试剂盒纯化的吗?没做过克隆，不会哦，想直接测序，不知道可以不？

直接测序的话，你的条带不纯，测不出来的，即使得到峰图，也不能用，有杂峰不可信啊。。。
赞一下 回复此楼
6楼2011-07-15 09:36:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyuaaa

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xp198766 at 2011-07-15 09:36:55:
直接测序的话，你的条带不纯，测不出来的，即使得到峰图，也不能用，有杂峰不可信啊。。。

那要是克隆测序呢，我是回收一次DGGE胶的，而且PCR产物又不是很纯，做克隆测序会有结果吗？
赞一下 回复此楼
7楼2011-07-15 10:32:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
PCR 产物不纯才必须要做克隆，不要，测序得不到结果啊。。
赞一下 回复此楼
8楼2011-07-15 10:44:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyuaaa

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xp198766 at 2011-07-15 10:44:26:
PCR 产物不纯才必须要做克隆，不要，测序得不到结果啊。。

请问Ta克隆测序的成功率有多高？会不会克隆测序也测不出来呢？
赞一下 回复此楼
9楼2011-07-15 20:05:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
引用回帖:
Originally posted by piaoyuaaa at 2011-07-15 20:05:25:
请问Ta克隆测序的成功率有多高？会不会克隆测序也测不出来呢？

TA克隆，你会测验条带长度的啊，一般如果切胶纯化后DNA含量较高的话，一般成功率有90%以上吧
赞一下 回复此楼
10楼2011-07-15 20:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 piaoyuaaa 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 328，0703考生求调剂，一志愿为东北师范大学 +4 观素律 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:24 by JourneyLucky
[考研] 0856材料与化工309分求调剂 +6 ZyZy…… 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:38 by JourneyLucky
[考研] 材料工程专硕，一志愿中国矿业大学，总分314，求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 抓着星星的女孩 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:47 by userper
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 工科调剂 +4 Jiang191123！ 2026-03-11 4/200 2026-03-13 15:15 by Miko19
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +4 ly3471z 2026-03-13 4/200 2026-03-13 13:00 by JourneyLucky
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭