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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请问PCR后的电泳只目的片段不清晰，并且出现引物带，应该从哪些方面调整
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emingju

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问PCR后的电泳只目的片段不清晰，并且出现引物带，应该从哪些方面调整

谢谢您！
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1楼2010-12-13 20:54:04
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
跑个大梯度。
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2楼2010-12-13 21:19:03
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天使托

专家顾问 (职业作家)
emingju(金币+5):谢谢你的建议，我再尝试一下，祝你试验顺利 2010-12-13 21:33:55
一般情况下只会出现目的条带，即便不清楚也只是目的条带，但是有时出现杂带，我考虑的原因是酶的问题，有些时候酶也会将不相关的条带扩增出来，我最近也是有杂带，但是大批量pcr出来以后，然后做个切胶纯化，再将目的基因纯化出来就可以进行下游操作了!
祝好运！
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3楼2010-12-13 21:31:20
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
目的片段不清楚的原因有很多，有引物二聚体的原因 ，可能是你的引物加多了，也可能的模板加的少了，你有杂带出现么？
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4楼2010-12-13 21:45:49
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emingju

银虫 (小有名气)
目的片段很模糊，下面还有条模糊地条带，我认为是引物带吧，可能是我的引物加的太多了 我再减少引物量或者增多点模板的量吧 ，谢谢你
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5楼2010-12-14 19:05:54
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果是引物二聚体的话，它是小于100bp，祝你好运！
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6楼2010-12-14 22:26:55
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leaf91626

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也碰到同样的问题，细菌的PCR产物中只出现 100bp的条带,很奇怪，我用的PCR MIX 体系，请高手指点
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7楼2012-04-09 23:40:27
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