【求助/交流】是PCR条件不对还是引物的原因？（附电泳图） - 分子生物 - 综合其他

meizishu

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2楼2011-04-14 19:07:09

meizishu

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3楼2011-04-14 19:08:02

zj408694018

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换个好一些的酶试试，我也遇到过，跟你那图一样的情况，换个好一些的酶就ok了

4楼2011-04-15 08:00:41

sfb1020

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能P出来目的条带说明引物没问题，是PCR条件没摸好
marker不亮我也遇到过这种问题，应该是胶的问题

5楼2011-04-15 09:40:24

beibei9535

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晕晕小版主~ 姑娘你好！

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西瓜(金币+3): 鼓励 2011-04-18 10:55:27

首先同学，是1和3图重复。
加样口有DNA没有跑出来，建议你在重新做胶跑电泳。
marker 没有问题啊，这样就可以的。
2扩征出来了，最大可能性说明你条件没有摸好，建议在做个梯度PCR.
当然也不排除可能引物设计不够完美的事情。
先做1.2看下哪里出问题。
最后在看看引物设计是否有问题。
一般使用premier primer5 设计引物，用oligo6做检验。

赞一下(2人)

最好的年龄是，那一天，终于知道并且坚信自己有多好，不是虚张，不是夸浮，不是众人捧，是内心明明澈澈知道：是的，我就是这么好。

6楼2011-04-15 09:48:22

kkunny

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引用回帖:

Originally posted by zj408694018 at 2011-04-15 08:00:41:
换个好一些的酶试试，我也遇到过，跟你那图一样的情况，换个好一些的酶就ok了

我也遇到过，由于酶不好，p了好几次，只有很有限的几个有条带，而且都很微弱的，最后换了个酶，都好了。

好好学习，天天向上

7楼2011-04-15 09:59:23

jimmy7633

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建议把基因组的浓度稀释下，做个梯度，再试试。

8楼2011-04-15 10:51:23

meizishu

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9楼2011-04-15 12:51:29

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10楼2011-04-15 12:53:17