24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 6514  |  回复: 10

dongfangzz

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR后电泳出现两条带是怎么回事? 已有10人参与

PCR后电泳出现两条带,一条是约170bp。另一条是200多bp,目的带是100多的。
这是什么原因?

模板是RNA逆转录之后的cDNA。
引物应该没问题,因为用同样的反应条件,同样的引物,有的cDNA模板不出现多余的条带。
那是模板的问题吗?
怎么避免呀?

[ Last edited by dongfangzz on 2010-9-15 at 23:35 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plantaqp

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该是非特异性扩增
2楼2010-09-15 05:22:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czjlove

禁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽

3楼2010-09-15 10:10:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhandeguo1

银虫 (小有名气)

PCR


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
模板纯吗?还是本来就是杂合子。
4楼2010-09-15 10:15:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hcoohboy

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+2):很全面 2010-09-15 10:54:56
引物做过blast吗?特异吗?
你的模板是cDNA还是基因组DNA?
你的退火温度优化过吗?一般提高温度会去除非特异性。
最初的梦想绝对会到达
5楼2010-09-15 10:44:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fykxy_206

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
特异性不好
6楼2010-09-15 10:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

8lzq-2009

木虫 (正式写手)

G-4


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一定是你的模板不纯,有两种物质在里面了。
相信才会有奇迹
7楼2010-09-15 12:19:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zdmei

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-09-15 23:41:46
可能是引物有错配,不过你应该提供更详细的信息,模板是gDNA,cDNA还是质粒,退火温度多少...可以切胶回收送测序看看是不是你要的序列
8楼2010-09-15 12:39:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongfangzz

银虫 (小有名气)

模板是RNA逆转录之后的cDNA。
引物应该没问题,因为用同样的反应条件,同样的引物,有的cDNA模板不出现多余的条带。
那是模板的问题吗?
怎么避免呀?

[ Last edited by dongfangzz on 2010-9-15 at 23:31 ]
9楼2010-09-15 23:29:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tj_fjl

新虫 (初入文坛)

错配,模板污染,非特异性扩增!
10楼2010-09-16 08:51:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dongfangzz 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +3 我要考大 2026-04-06 3/150 2026-04-06 09:19 by dongzh2009
[考研] 材料调剂 +14 壹贰贰亿 2026-04-04 14/700 2026-04-05 23:31 by 来看流星雨10
[考研] 320分人工智能调剂 +8 振—TZ 2026-04-03 8/400 2026-04-05 22:33 by 范式思维
[考研] 08600生物与医药-327 +6 18755400796 2026-04-05 6/300 2026-04-05 22:03 by imissbao
[考研] 材料专硕 调剂 +14 CXN123456 2026-04-03 14/700 2026-04-05 17:18 by Hdyxbekcb
[考研] 290求调剂085701 +10 1314捧花 2026-04-02 10/500 2026-04-05 10:19 by Sealedwind
[考研] 324求调剂 +9 想上学求调 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:57 by 果冻大王
[考研] 324求调剂 +14 想上学求调 2026-04-02 15/750 2026-04-04 20:31 by 无际的草原
[考研] 306求调剂 +3 hyb上名工 2026-04-02 3/150 2026-04-04 18:12 by 热情沙漠
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
[考研] 316求调剂 +14 舟自梗 2026-04-01 18/900 2026-04-03 10:28 by linyelide
[考研] 交通运输考试264分求工科调剂 +4 jike777 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:53 by zllcz
[考研] 296求调剂 +4 sdhu 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:29 by baoball
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:52 by yulian1987
[考研] 085602化学工程268分蹲调剂 +8 月照花林。 2026-04-01 8/400 2026-04-01 22:08 by 无际的草原
[考研] 326求调剂 +4 崽崽仔 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:58 by 我的船我的海
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 一志愿浙江大学工科动力工程370,数一121,专业课135,现在能去哪里 +3 080700调剂 2026-03-30 4/200 2026-03-31 12:00 by KLMY666
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
信息提示
请填处理意见