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nancy0911

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因组dna检测条带很亮 PCR扩增后条带非常弱 求助

着急求助 请论坛里的高手给予菜鸟指点呀 感激不尽

试剂盒提取放线菌的DNA   电泳检测条带很亮 可是经过扩增条带非常暗淡 测不了序
麻烦大家帮帮忙丫
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励应助! 2012-03-18 17:29:31
nancy0911: 金币+1 2012-05-18 16:10:31
提取出来的DNA 定量了么?浓度多少?
用作pcr模板稀释过了么?
PCR扩增条件是摸索好的,还是不清楚……
条带暗淡,是不是可以回收,转化,筛菌,然后送菌液测序呢。
2楼2012-03-17 20:09:01
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水泗晶

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励应助 2012-03-18 17:30:00
楼上太狠了,回收,转化,筛菌,然后送菌液测序,时间啊,money啊~~
如果用楼上说的模板稀释后还是信号弱的话,建议可以直接换引物了
3楼2012-03-18 10:08:26
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nancy0911

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaoyang636 at 2012-03-17 20:09:01:
提取出来的DNA 定量了么?浓度多少?
用作pcr模板稀释过了么?
PCR扩增条件是摸索好的,还是不清楚……
条带暗淡,是不是可以回收,转化,筛菌,然后送菌液测序呢。

PCR模板稀释?我提取的dna 直接用te溶的 1微升做的模板 。。。
DNA定量是100ng/ul 稀释20倍  基因组条带很好
4楼2012-03-27 08:41:01
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