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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因组dna检测条带很亮 PCR扩增后条带非常弱 求助
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nancy0911

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因组dna检测条带很亮 PCR扩增后条带非常弱 求助

着急求助 请论坛里的高手给予菜鸟指点呀 感激不尽

试剂盒提取放线菌的DNA   电泳检测条带很亮 可是经过扩增条带非常暗淡 测不了序
麻烦大家帮帮忙丫
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1楼 2012-03-17 18:15:21
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励应助！ 2012-03-18 17:29:31
nancy0911: 金币+1 2012-05-18 16:10:31
提取出来的DNA 定量了么？浓度多少？
用作pcr模板稀释过了么？
PCR扩增条件是摸索好的，还是不清楚……
条带暗淡，是不是可以回收，转化，筛菌，然后送菌液测序呢。
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2楼2012-03-17 20:09:01
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水泗晶

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励应助 2012-03-18 17:30:00
楼上太狠了，回收，转化，筛菌，然后送菌液测序，时间啊，money啊~~
如果用楼上说的模板稀释后还是信号弱的话，建议可以直接换引物了
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-18 10:08:26
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nancy0911

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gaoyang636 at 2012-03-17 20:09:01:
提取出来的DNA 定量了么？浓度多少？
用作pcr模板稀释过了么？
PCR扩增条件是摸索好的，还是不清楚……
条带暗淡，是不是可以回收，转化，筛菌，然后送菌液测序呢。

PCR模板稀释？我提取的dna 直接用te溶的 1微升做的模板 。。。
DNA定量是100ng/ul 稀释20倍  基因组条带很好
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4楼2012-03-27 08:41:01
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