应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】pcr条带不亮
71/1返回列表
查看: 1678  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

鬼娃娃不要天

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】pcr条带不亮

我最近一直在做pcr，开始的时候我选用的是10ul体系，后来做30ul体系的时候条带就不亮，而且有些还扩增不出来，后来加大模板量，也没有用，循环数是35个，而且也做了温度梯度，没有梯度的变化，我不知道是哪里出错了。
我扩的是细菌的amoA基因，请问一下怎么检测模板有没有问题？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-31 15:07:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-31 20:29:43
鬼娃娃不要天(金币+1): 2011-04-04 12:22:48
你是用什么作为模板的？裂解的菌液还是细菌基因组？
一般100Ul体系也都没有什么问题的，关键是把退火温度选择好，还有延伸时间！
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-31 15:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yucheng9255

木虫 (著名写手)
检测模板可以用内参
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-01 11:32:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼娃娃不要天

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-31 15:55:06:
你是用什么作为模板的？裂解的菌液还是细菌基因组？
一般100Ul体系也都没有什么问题的，关键是把退火温度选择好，还有延伸时间！

我用的是微生物全基因组，因为我的目的条带是amoA基因，后来我做了个温度梯度的，一条带都没见到，不知道是哪出错了？
赞一下 回复此楼
4楼2011-04-04 12:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼娃娃不要天

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by yucheng9255 at 2011-04-01 11:32:02:
检测模板可以用内参

内参是什么呀?我不懂，因为我是刚刚开始接触分子实验的。
赞一下 回复此楼
5楼2011-04-04 12:22:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangby2002

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 鬼娃娃不要天 at 2011-04-04 12:22:23:
内参是什么呀?我不懂，因为我是刚刚开始接触分子实验的。

我做的是鱼类，一般内参用的是b-actin和18S
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-04-04 13:04:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2010203011

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 鬼娃娃不要天 at 2011-04-04 12:22:23:
内参是什么呀?我不懂，因为我是刚刚开始接触分子实验的。

细菌好像一般都扩16rS DNA
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-04-12 16:35:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 鬼娃娃不要天 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-17 7/350 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +10 曦熙兮 2026-03-15 10/500 2026-03-18 14:19 by 007_lilei
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +4 ioodiiij 2026-03-17 4/200 2026-03-18 12:36 by Linda Hu
[考研] 0703化学调剂 +4 pupcoco 2026-03-17 7/350 2026-03-18 12:14 by djl2006
[考研] 环境工程调剂 +8 大可digkids 2026-03-16 8/400 2026-03-18 09:36 by zhukairuo
[考研] 334求调剂 +3 志存高远意在机� 2026-03-16 3/150 2026-03-18 08:34 by lm4875102
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[基金申请] 被我言中：新模板不强调格式了，假专家开始管格式了 +4 beefly 2026-03-14 4/200 2026-03-17 22:04 by 黄鸟于飞Chao
[考研] 考研化学学硕调剂，一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗？ 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭