应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】pcr条带不亮
51/1返回列表
查看: 1975  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

鬼娃娃不要天

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】pcr条带不亮

我最近一直在做pcr，开始的时候我选用的是10ul体系，后来做30ul体系的时候条带就不亮，而且有些还扩增不出来，后来加大模板量，也没有用，循环数是35个，而且也做了温度梯度，没有梯度的变化，我不知道是哪里出错了。
我扩的是细菌的amoA基因，请问一下怎么检测模板有没有问题？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-03-31 15:07:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangby2002

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 鬼娃娃不要天 at 2011-04-04 12:22:23:
内参是什么呀?我不懂，因为我是刚刚开始接触分子实验的。

我做的是鱼类，一般内参用的是b-actin和18S
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-04-04 13:04:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-31 20:29:43
鬼娃娃不要天(金币+1): 2011-04-04 12:22:48
你是用什么作为模板的？裂解的菌液还是细菌基因组？
一般100Ul体系也都没有什么问题的，关键是把退火温度选择好，还有延伸时间！
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-31 15:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yucheng9255

木虫 (著名写手)
检测模板可以用内参
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-01 11:32:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼娃娃不要天

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-31 15:55:06:
你是用什么作为模板的？裂解的菌液还是细菌基因组？
一般100Ul体系也都没有什么问题的，关键是把退火温度选择好，还有延伸时间！

我用的是微生物全基因组，因为我的目的条带是amoA基因，后来我做了个温度梯度的，一条带都没见到，不知道是哪出错了？
赞一下 回复此楼
4楼2011-04-04 12:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭