24小时热门版块排行榜    

查看: 4814  |  回复: 8

暖阳ny2

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳的时候,总DNA跑出条带,PCR扩增后没有条带,都有什么原因啊 已有5人参与

我用的是金黄色葡萄球菌,5%chelex-100作的裂解液,高温水煮方法提的DNA
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
dllchina: 金币+1, good~ 2014-04-24 21:38:08
你这个问题太大了,首先你要确定一下你的DNA的质量,然后PCR的时候,有没有正对照?如果CK+是可以的,那么要考虑你的DNA质量了。
致良知
2楼2014-04-23 20:58:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
影响PCR扩增结果原因多了,没有条带,就试着从源头找起,如引物特异性,体系,程序等。
学习使你立于不败之地
3楼2014-04-23 21:11:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
dllchina: 金币+1 2014-04-24 21:37:56
引物量,DNA浓度太高,PCR条件没弄好
但行好事,莫问前程
4楼2014-04-24 09:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a188202881a

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是pcr体系没找好,或者是dna提纯不好

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-04-24 09:49:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xichun

新虫 (初入文坛)

多半和你的引物设计和量有关系,体系也可能有关系。
6楼2014-04-24 10:19:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hgdcongcong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先跑电泳能出条带,请问条带位置正确吗?如果不正确,会不会是DNA制备过程中讲解了,或者其他原因导致DNA受损;如果条带位置正确,那么就很有可能是PCR体系环节有问题,比如使用的引物是否有效(特异性、合成引物本身的质量),扩增参数设置(退火温度是否合适、延伸时间是否足够)是否正确等等。
7楼2014-04-24 16:47:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暖阳ny2

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by hgdcongcong at 2014-04-24 16:47:12
首先跑电泳能出条带,请问条带位置正确吗?如果不正确,会不会是DNA制备过程中讲解了,或者其他原因导致DNA受损;如果条带位置正确,那么就很有可能是PCR体系环节有问题,比如使用的引物是否有效(特异性、合成引物 ...

谢谢哦,验证了下,应该是引物有问题
8楼2014-05-05 11:28:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

常常遇到这种问题,换了试剂盒使用高保真Taq酶扩增,效果都不错
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
9楼2015-07-16 15:47:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 暖阳ny2 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 312求调剂 +4 陌宸希 2026-03-16 5/250 2026-03-17 17:09 by ruiyingmiao
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-11 8/400 2026-03-17 09:36 by 努力学习赚彩礼
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
信息提示
请填处理意见