24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 7587  |  回复: 9

ccxj99

银虫 (小有名气)

[交流] PCR扩增的特异性条带是啥意思? 已有5人参与

是在PCR中扩增前还是扩增后确定特异性条带的啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

三十不惑

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 回帖置顶 2012-08-28 19:39:33
amisking: 金币+5, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2012-08-28 19:39:43
这个要看你实验目的,你是想得到什么片段。如果你想得到全长,那就用全长引物进行扩增,得到的全长片段就是特异性片段。如果你用部分引物进行扩增,那得到的部分片段就是特异性片段。
特异性与非特异性是对立的。理论上讲用一对正确的引物进行扩增只可能得到一个片段,但如果得到了两个,那那个正确的片段就是特异性的,不正确的片段就是非特异性的片段。正确与不正确一般我们是通过片段的长度来判断的,你使用正确的引物进行PCR扩增,必然只能得到一个序列,这个序列的长度是固定的不可变的。你对PCR产物进行电泳,如果条带正好在这个位置,那你可以认为这个产物就是特异性的,如果不在这个位置或者在这个位置之外还有其他的位置有条带,那这些都是非特异性的。
个性签名
6楼2012-08-28 16:54:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

三十不惑

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
理论上讲,合理的引物进行目的基因的PCR扩增,扩增后电泳仅会出现一条目标片段。如果在电泳时出现多条非目的片段的条带,即为非特异性条带。
个性签名
2楼2012-08-28 15:14:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccxj99

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 三十不惑 at 2012-08-28 15:14:14
理论上讲,合理的引物进行目的基因的PCR扩增,扩增后电泳仅会出现一条目标片段。如果在电泳时出现多条非目的片段的条带,即为非特异性条带。

特异性片段是什么意思,在扩增前就确定吗? 还是扩增前只能确定基因?
3楼2012-08-28 15:16:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三十不惑

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-08-28 19:39:31
所谓的特异性片段即是指你想要扩增得到的片段。 在你设计PCR引物的时候就应该知道你扩出来的是什么了,你想要扩出来的就是目的片段也即是特异性片段
个性签名
4楼2012-08-28 15:39:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccxj99

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 三十不惑 at 2012-08-28 15:39:48
所谓的特异性片段即是指你想要扩增得到的片段。 在你设计PCR引物的时候就应该知道你扩出来的是什么了,你想要扩出来的就是目的片段也即是特异性片段

假如我知道全场基因,如何确定特异性片段? 还是只要是基因中的某段就行?
5楼2012-08-28 16:03:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
笼统的说,就是你设计的上下游引物之间的模板序列。
7楼2012-08-29 09:08:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

exon2002

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
就是PCR扩增出来的已知片段
8楼2012-08-30 08:01:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王礼鹏

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
就是你想得到的目的片段,即上下游引物之间的那段,理论上讲你设计的引物是特异性的,PCR得到的是一条条带,即目的条带,如果有多条,那其他的就是非特异性条带。。。。。。。
9楼2012-08-30 08:56:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WHY67

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 三十不惑 at 2012-08-28 16:54:00
这个要看你实验目的,你是想得到什么片段。如果你想得到全长,那就用全长引物进行扩增,得到的全长片段就是特异性片段。如果你用部分引物进行扩增,那得到的部分片段就是特异性片段。
特异性与非特异性是对立的。理 ...

你好,我想请问一下,就是我做的植物DNA,我根本不知道这个DNA应该跑到哪个位置,那我怎么判断哪个位置就应该是特异性条带呢?谢谢你,希望您回复一下,我最近为了我这个实验也是操碎了心。我是菜鸟级别的。
10楼2018-12-05 15:56:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ccxj99 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +9 王王白石 2026-04-06 10/500 2026-04-07 19:55 by macy2011
[考研] 081700,311,求调剂 +17 冬十三 2026-04-04 18/900 2026-04-07 12:50 by Sammy2
[考研] 080500求调剂 +12 黄宇博 2026-04-06 12/600 2026-04-07 12:41 by upczlm1989
[考研] 285求调剂 +16 哦呦呼o 2026-04-04 16/800 2026-04-07 12:31 by 1018329917
[考研] 初试301,代码085701环境工程,本硕一致,四六级已过,有二区一作,共发表5篇论文 +11 axibli 2026-04-01 12/600 2026-04-07 11:20 by audery861007
[考研] 考研调剂 +3 Wwwwwww哇 2026-04-06 3/150 2026-04-06 20:55 by lbsjt
[考研] 材料调剂 +5 小刘同学吖吖 2026-04-06 5/250 2026-04-06 18:34 by sherry_1901
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +10 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 18:51 by 蓝云思雨
[考研] 282电子信息0854专硕调剂 +4 202451007219 2026-04-02 6/300 2026-04-04 21:55 by laoshidan
[考研] 283求调剂 +4 mcbbc 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:51 by imissbao
[考研] 一志愿0817化学工程与技术,求调剂 +24 我不是只因 2026-04-02 28/1400 2026-04-04 15:15 by dongzh2009
[考研] 材料科学与工程考研 +10 拯救皮特托先生 2026-04-02 10/500 2026-04-03 23:57 by userper
[考研] 338求调剂 +7 晟功? 2026-04-03 7/350 2026-04-03 16:46 by wxiongid
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:06 by arrow8852
[考研] 11408,284分,二战真诚求调剂 +4 12.27 2026-04-02 4/200 2026-04-03 14:14 by dxiaoxin
[考研] 调剂 +3 osbbx 2026-04-02 3/150 2026-04-03 07:47 by cc8418
[考研] 085600,320分求调剂 +6 大馋小子 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:54 by dongzh2009
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:52 by yulian1987
[考研] 377求调剂 +3 RASKIN 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:45 by zzchen2000
[考研] 化学工程专硕324分,一志愿中国矿业大学求调剂 +7 耿耿1314 2026-04-01 7/350 2026-04-02 07:40 by 尚水阁主
信息提示
请填处理意见