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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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ysn5048

银虫 (小有名气)

[求助] PCR产物鉴定时有目的条带,跑回收胶时却没有目的条带,这是为什么?

实验室内最近有人做1000bp目的片段的克隆,50ul体系的PCR反应液,反应结束后抽5ul跑鉴定胶,显示有目的条带,但跑回收胶的时候却没有目的条带了,这是为什么?求助各位专家
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有时候,一句话,可以改变未来
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回帖置顶 ( 共有1个 )

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

ysn5048: 回帖置顶 2012-09-20 17:02:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-20 16:35:11
还没到回收那一步呢,配胶别人用的同一批都没有任何问题,Marker正常跑出来额...

跑回收胶的意思不是胶回收后,鉴定有没有回收到的那次胶?
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-09-20 16:39:32
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

生物大虫

金虫 (小有名气)

你这目的条带在切胶前亮度如何,有可能在胶回收的操作中损耗了
谋事在人成事在天
13楼2012-10-10 08:24:25
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普通回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ysn5048: 金币+1, 有帮助 2012-09-20 16:49:36
ysn5048: 金币+1, 有帮助 2012-09-22 01:12:04
1:胶回收试剂盒是不是过期了?
2:配胶没问题?Marker跑的正常?
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2012-09-20 16:17:40
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ysn5048

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Marado at 2012-09-20 16:17:40
1:胶回收试剂盒是不是过期了?
2:配胶没问题?Marker跑的正常?

还没到回收那一步呢,配胶别人用的同一批都没有任何问题,Marker正常跑出来额
有时候,一句话,可以改变未来
3楼2012-09-20 16:35:11
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ysn5048

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Marado at 2012-09-20 16:39:32
跑回收胶的意思不是胶回收后,鉴定有没有回收到的那次胶?...

对,跑回收胶的意思是在用回收试剂盒之前跑的胶,然后通过切胶进行回收
有时候,一句话,可以改变未来
5楼2012-09-20 16:47:02
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黑色de星期⑧

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ysn5048: 金币+1, 有帮助 2012-09-20 20:14:33
ysn5048: 金币+1, 有帮助 2012-09-22 12:27:00
推测你是不是忘加buffer了,理论上你前面有条带,后面大量跑胶时也应该有
6楼2012-09-20 20:03:27
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ysn5048

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 黑色de星期⑧ at 2012-09-20 20:03:27
推测你是不是忘加buffer了,理论上你前面有条带,后面大量跑胶时也应该有

感谢回复,但buffer的确是加了。。。
有时候,一句话,可以改变未来
7楼2012-09-20 20:15:37
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三撇五撇

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-21 14:11:57
ysn5048: 金币+1, 有帮助 2012-09-22 01:11:49
会不会是没跑开?鉴定时跑的不开感觉有  而回收时跑开了就显示没有
或者是胶漏了?
还是中间隔的时间久,降解了?
8楼2012-09-20 23:21:18
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junminh

铜虫 (小有名气)

把电泳图放上来大家看看,省得大家猜原因。没有回收回来,肯定是有原因的1)胶回收试剂盒失效;2)DNA浓度太低,电泳很淡看不见;3)真的就是没有,如果是这个原因,可能真的需要分析下原因了,这个问题,也有朋友遇见过,比较难分析。
9楼2012-09-23 08:34:10
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

10楼2012-09-23 14:21:29
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