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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物鉴定时有目的条带，跑回收胶时却没有目的条带，这是为什么？
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ysn5048

银虫 (小有名气)

[求助] PCR产物鉴定时有目的条带，跑回收胶时却没有目的条带，这是为什么？

实验室内最近有人做1000bp目的片段的克隆，50ul体系的PCR反应液，反应结束后抽5ul跑鉴定胶，显示有目的条带，但跑回收胶的时候却没有目的条带了，这是为什么?求助各位专家
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有时候，一句话，可以改变未来
1楼 2012-09-20 16:15:11
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

生物大虫

金虫 (小有名气)
你这目的条带在切胶前亮度如何，有可能在胶回收的操作中损耗了
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谋事在人成事在天
13楼2012-10-10 08:24:25
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普通回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ysn5048: 金币+1, ★有帮助 2012-09-20 16:49:36
ysn5048: 金币+1, ★有帮助 2012-09-22 01:12:04
1：胶回收试剂盒是不是过期了？
2：配胶没问题？Marker跑的正常？
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2012-09-20 16:17:40
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ysn5048

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Marado at 2012-09-20 16:17:40
1：胶回收试剂盒是不是过期了？
2：配胶没问题？Marker跑的正常？

还没到回收那一步呢，配胶别人用的同一批都没有任何问题，Marker正常跑出来额
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有时候，一句话，可以改变未来
3楼2012-09-20 16:35:11
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer
ysn5048: 回帖置顶 2012-09-20 17:02:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-20 16:35:11
还没到回收那一步呢，配胶别人用的同一批都没有任何问题，Marker正常跑出来额...

跑回收胶的意思不是胶回收后，鉴定有没有回收到的那次胶？
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-09-20 16:39:32
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ysn5048

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Marado at 2012-09-20 16:39:32
跑回收胶的意思不是胶回收后，鉴定有没有回收到的那次胶？...

对，跑回收胶的意思是在用回收试剂盒之前跑的胶，然后通过切胶进行回收
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有时候，一句话，可以改变未来
5楼2012-09-20 16:47:02
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黑色de星期⑧

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ysn5048: 金币+1, ★有帮助 2012-09-20 20:14:33
ysn5048: 金币+1, ★有帮助 2012-09-22 12:27:00
推测你是不是忘加buffer了，理论上你前面有条带，后面大量跑胶时也应该有
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6楼2012-09-20 20:03:27
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ysn5048

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 黑色de星期⑧ at 2012-09-20 20:03:27
推测你是不是忘加buffer了，理论上你前面有条带，后面大量跑胶时也应该有

感谢回复，但buffer的确是加了。。。
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有时候，一句话，可以改变未来
7楼2012-09-20 20:15:37
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三撇五撇

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-21 14:11:57
ysn5048: 金币+1, ★有帮助 2012-09-22 01:11:49
会不会是没跑开？鉴定时跑的不开感觉有  而回收时跑开了就显示没有
或者是胶漏了？
还是中间隔的时间久，降解了？
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8楼2012-09-20 23:21:18
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junminh

铜虫 (小有名气)
把电泳图放上来大家看看，省得大家猜原因。没有回收回来，肯定是有原因的1）胶回收试剂盒失效；2）DNA浓度太低，电泳很淡看不见；3）真的就是没有，如果是这个原因，可能真的需要分析下原因了，这个问题，也有朋友遇见过，比较难分析。
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9楼2012-09-23 08:34:10
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
10楼2012-09-23 14:21:29
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